海洋贻贝粘附蛋白新型生物粘合剂的研究

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海洋贻贝粘附蛋白具有高强度、高韧性、高防水性和极强粘附基体的功能,这与其特殊的分子结构—多巴(DOPA)介导的链间交联和与基体之间的相互作用方式有关。它还具有很好的生物相容性和可降解性,是一类极具优势和潜力的生物粘合剂。本文首先根据丙酮沉淀蛋白的原理从翡翠贻贝足部直接提取粘附蛋白Pvfp(Perna viridis foot protein),同时利用基因重组法制备厚壳贻贝粘附蛋白Mcfp-1(Mytilus coruscus foot protein 1)的功能肽段(命名为Mcfp-1-12),然后对这两种方法得到的粘附蛋白或肽段进行系列性能研究,结果如下:(1)Pvfp和Mcfp-1-12在玻片、聚苯乙烯细胞培养肌、铝和钛的表面都具有较好的粘附效果,与商业化的细胞和组织粘附剂CELL-TAKTM相比,具有相似甚至更好的粘附能力。(2)石英晶体微天平(QCM)定量检测粘附蛋白在金表面粘附量的结果表明,两种粘附蛋白都比CELL-TAKTM具有更高的粘附量。(3)Pvfp和Mcfp-1-12在1h内就能很好的粘附细胞,其粘附细胞的能力与CELL-TAKTM相比,Mcfp-1-12具有类似的粘附效果,Pvfp甚至具有更好的粘附效果;与多聚赖氨酸(PLL)相比,两种粘附蛋白都具有更强的粘附能力,并体现出其优于PLL的防水优越性。(4)Pvfp和Mcfp-1-12都具有良好的细胞相容性。(5)潮湿条件下微量的粘附蛋白就能粘接塑料耗材和断裂的小鼠股骨;大量蛋白的粘接强度测试表明,Pvfp具有高于医用粘合剂Fibrin近一倍的粘接强度。以上结果显示,本研究制备的贻贝粘附蛋白具有优良的防水性,较高的粘接强度和良好的细胞相容性,有望在生物医学领域用作生物粘合剂。
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