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目的:体外培养人主动脉平滑肌细胞,明确尿毒症血清可激活NLRP3炎症体信号通路介导VSMCs增殖,并探索NLRP3抑制剂对VSMCs增殖的抑制作用。方法:收集尿毒症患者及健康人血清,以10%的血清浓度作用于VSMCs,将实验分为4组:尿毒症血清组(U)、健康血清组(N)、尿毒症血清+格列苯脲组(U+Gli)、健康血清+格列本脲组(N+Gli)。1.VSMCs培养与处理:人主动脉平滑肌细胞(HASMCs)购于美国ATCC公司,用10%尿毒症血清刺激,以健康血清作对照;进一步尝试格列本脲对VSMCs增殖的抑制作用。2.VSMCs NLRP3 m RNA表达水平检测:RT-PCR方法检测NLRP3 m RNA表达量。3.VSMCs NLRP3、Caspase-1活性检测:Western Blots法检测NLRP3、Caspase-1 p20蛋白表达量。4.VSMCs增殖活性检测:使用ELISA检测试剂盒测定溴脱氧尿苷(Brdu)摄取量,通过分析Brdu摄取量来判断VSMCs的增殖活性。结果:与健康血清组比较,尿毒症血清组VSMCs NLRP3 m RNA表达量增多,NLRP3与Caspase-1 p20蛋白表达量也升高,细胞培养上清液中Brdu含量增多,两组对照分析,差别有统计学意义(P<0.05)。而格列本脲处理前后,尿毒症血清组和健康血清组相比较,NLRP3 m RNA、NLRP3蛋白、Caspase-1 p20蛋白表达量均减少,Brdu摄取量也随之减少,差别具有统计学意义(P<0.05)。结论:尿毒症血清通过激活NLRP3炎症复合体信号通路,可以促进人主动脉平滑肌细胞增殖,而格列苯脲可通过抑制NLRP3炎症体活化进而抑制血管平滑肌细胞的增殖。