【摘 要】
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对羟基苯甲酸酯(p-hydroxybenzoic acid esters)又称尼泊金酯(parabens),具有广谱抗菌性、高效低毒等优点,被作为防腐剂广泛应用于个人护理产品、化妆品、食品、保健品和药品。其中,对羟基苯甲酸甲酯(methylparaben,MP)和对羟基苯甲酸丙酯(propylparaben,PP)使用频率最高。研究发现对羟基苯甲酸酯类具有雌激素效应,作为内分泌干扰物,对生物体生长
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对羟基苯甲酸酯(p-hydroxybenzoic acid esters)又称尼泊金酯(parabens),具有广谱抗菌性、高效低毒等优点,被作为防腐剂广泛应用于个人护理产品、化妆品、食品、保健品和药品。其中,对羟基苯甲酸甲酯(methylparaben,MP)和对羟基苯甲酸丙酯(propylparaben,PP)使用频率最高。研究发现对羟基苯甲酸酯类具有雌激素效应,作为内分泌干扰物,对生物体生长发育、生殖系统等方面造成影响。本研究以野生型黑腹果蝇(Drosophilae mlanogaster)作为实验材料,采用MP和PP混合(质量比1:1)处理果蝇,探讨其对果蝇寿命、抗氧化能力和细胞凋亡造成的影响。将果蝇分别暴露于0mg/L(对照组)和浓度组300mg/L、700mg/L和1000mg/L的MP和PP混合酯,检测新羽化的雌雄果蝇存活率,计算平均寿命、最高寿命和半数死亡时间。选取MP和PP混合处理1d、5d、15d、20d和25d的雌雄果蝇,分别对其体内SOD、CAT、GST活性和MDA含量进行检测。将雌果蝇中肠剖取制成细胞悬浮液,采用单细胞凝胶电泳(SCGE)检测DNA损伤情况,运用Casp软件分析彗星图像的尾长(TL)、尾部DNA相对含量(TD)、头部DNA相对含量(HD)和Olive尾距(OTM)。采用qRT-PCR检测促凋亡基因reaper、Debcl和凋亡抑制基因Diap1和Buffy的相对表达量。本研究的主要结论:(1)雌雄果蝇的存活率经MP和PP混合暴露均呈现下降趋势,300mg/L组的雌蝇存活数25d开始急速下降,700mg/L和1000mg/L组则在10-20d呈迅速下降趋势。雄蝇的存活曲线下降幅度相比于雌蝇更为剧烈,浓度组的下降趋势15d开始加快。雌雄果蝇的平均寿命、半数死亡时间和最高寿命明显缩短,其中雌蝇平均寿命为对照组的60%,雄蝇为对照组的54%。(2)雌雄果蝇SOD和CAT活力经MP和PP混合暴露呈现先上升后下降的趋势,1d和5d高于对照组,700mg/L和1000mg/L组SOD和CAT活力10d下降。GST活力5d开始明显下降。雌雄果蝇脂质过氧化产物MDA含量均显著升高,其中1000mg/L组在25d达到最大值。(3)DNA损伤随着暴露天数和浓度的增加而愈加剧烈,其中300mg/L组20d开始DNA损伤加剧,TD值增加,表现为轻度损伤。700mg/L组在1d和5d为轻度损伤,随时间延长TL值和OTM增加,10d表现中度损伤。1000mg/L组25d呈高度损伤,TD值达到43.26±1.46%。(4)果蝇促凋亡基因Debcl和reaper相对表达量总体上调,雌蝇300mg/L组5d和15d Debcl相对表达量上调,700mg/L组10d相对表达量达到最大值;雄蝇1000mg/L组相对表达量在5d、10d、15d和20d均增加,雌蝇1000mg/L组reaper相对表达量10d表达量最大,雄蝇则上调幅度大于雌蝇。凋亡抑制基因Buffy和Diap1的相对表达量在雌雄果蝇中均下调,抑制细胞凋亡能力减弱,促进了果蝇体内细胞凋亡过程。综上,对羟基苯甲酸酯类引起果蝇细胞脂质过氧化反应加剧,MDA含量升高,同时抑制SOD、CAT和GST抗氧化酶活性,造成果蝇中肠细胞DNA损伤,诱导细胞凋亡。本研究为进一步评估对羟基苯甲酸酯类安全性提供了数据支持。
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