泰乐菌素（Tylosin,TYL）,是从弗氏链霉菌的培养液中获得的一种大环内酯类抗生素。替米考星（Tilmicosin,TMC）是由TYL为前体物半合成而得。因为其良好的抑菌性,TYL和TMC被广泛应用于畜牧养殖业。但是这些药物的残留会引起人体的过敏反应,对抗生素产生抗药性等危害。因此,加强对食品中此类抗生素的监控至关重要。目前TYL和TMC的分析方法主要是液相色谱法、液质联用法等,这些方法准确可靠,常作为确证方法,但设备昂贵、前处理繁琐耗时、样品通量低,无法进行现场监控。免疫检测技术是利用抗原抗体反应与酶促反应相结合的一种技术,具有灵敏、快速、速高通量等特点,可与仪器确证技术搭配应对量大面宽的农产品、食品安全快速筛查需求,近年来已成为研究热点。本文以TYL和TMC为对象,设计合成了4个半抗原并制备了TYL单克隆抗体,分别建立了间接竞争酶联免疫分析法和胶体金免疫层析分析法。研究内容如下:（1）分别以TYL和TMC为原料设计合成出了4种半抗原,通过活泼酯法偶联载体蛋白进行动物免疫实验,获得了能够特异性识别TYL的抗血清,在1μg/mL TYL药物条件下,其抑制率为89%。进一步通过细胞实验筛选出能特异性识别TYL的单克隆抗体。（2）基于单克隆抗体建立了检测TYL的间接竞争酶联免疫分析（ciELISA）方法。通过优化后,该方法的检测限为0.58 ng/mL,IC₅₀为4.72 ng/mL,线性检测范围为1.26¹7.65 ng/mL;与TMC的交叉率为48.96%,TMC的检测限为1.31ng/mL,IC₅₀为9.64 ng/mL,线性检测范围为1.96⁴7.40 ng/mL。与其余大环内酯类抗生素及结构功能类似物交叉反应率均<0.1%,方法特异性好,批内批间的变异系数均<15%,方法精密度高。牛奶、水样品经前处理优化和倍比稀释法消除基质效应,平均添加回收率在76.35¹09.50%之间,检测结果与HPLC-MS/MS方法对比相关性良好。（3）基于单克隆抗体制备了检测TYL的胶体金免疫层析试纸条（GICA）。通过优化后,该方法的IC₅₀为18.95ng/mL,检测范围（B/B0=0¹时所对应的x值）为1.56⁷6.92 ng/mL,在缓冲溶液中的可视化检测限为50 ng/mL。与TMC的交叉率为100.69%,IC₅₀为18.82 ng/mL,检测范围为1.74²03 ng/mL,与其余大环内酯类抗生素及结构功能类似物交叉反应率均<0.1%,样品平均添加回收率在65.96¹26.12%之间,检测结果与HPLC-MS/MS方法对比相关性良好。