论文部分内容阅读
波导耦合金属光子晶体(MPC)在入射光波激发下会发生局域表面等离子共振耦合波导共振现象,使等离子共振响应得到显著放大,可以用于制备高灵敏度,非标记,实时监测的光学生物传感器,在临床诊断、环境保护、食品安全检测和药物筛选等领域具有巨大的应用潜力。课题的前期已经成功构建出基于波导耦合金属光子晶体的生物传感器系统,并进行了基本的免疫检测。为了进一步提高波导耦合金属光子晶体生物传感器的检测灵敏度,并研究波导耦合金属光子晶体对生物分子的响应特性,本课题研究了如何在波导耦合金属光子晶体生物传感器表面稳定、有效地固定抗体,并验证其在免疫检测中的应用。本论文研究内容主要包括:1.利用A蛋白对金的高度亲和力和特异性吸附抗体Fc片段的能力,对波导耦合金属光子晶体生物传感芯片进行表面修饰,并在波导耦合金属光子晶体生物传感芯片表面定向固定FITC标记的羊抗兔荧光抗体,通过荧光显微镜观察荧光分布,证明经过A蛋白的表面修饰后,抗体能更加有序地固定在波导耦合金属光子晶体生物传感芯片表面,且分布更密集,有利于下一步的抗原检测。2.用A蛋白对波导耦合金属光子晶体生物传感器芯片进行表面修饰,在波导耦合金属光子晶体生物传感芯片表面定向固定兔抗小鼠IgG。通过实时检测兔抗小鼠IgG与系列浓度小鼠IgG的免疫反应过程,得到波导耦合金属光子晶体对免疫反应的浓度响应特性,结果表明信号响应随浓度变化具有较好的线性特性,并证明经过A蛋白的表面修饰后,固定抗体能保持较好的生物活性,得到较高的抗原抗体反应效率,使检测信号强度增强1.8-6.5倍,检测灵敏度提高至少6倍。3.把抗HIV-1p24的单克隆抗体用A蛋白定向固定在波导耦合金属光子晶体生物传感芯片表面,实现了抗HIV-1p24的单克隆抗体与10ug/ml p24抗原的免疫反应过程的实时、非标记检测。本研究使用A蛋白第一次对波导耦合金属光子晶体生物传感器芯片进行表面修饰,使抗体有效,稳定地固定,证明A蛋白修饰可以有效提高波导耦合金属光子晶体生物传感器的检测灵敏度,并验证了传感器实时、非标记免疫检测的功能,为该传感器将来的应用推广奠定基础。