【摘 要】
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精液的保存,可以实现精液的异地运输,保证种质资源的合理跨地域利用,具有非常重要的现实意义。本研究采用Uppsala稀释液为基础稀释液,对精液进行了低温保存和冷冻保存,并分别在稀释液中添加不同浓度的蜂王浆和壳寡糖,通过保存后精子活力,活率,质膜完整率,顶体完整率,丙二醛（MDA）水平,过氧化氢酶（CAT）水平和总抗氧化能力等水平的检测,筛选出最佳添加浓度,并将最佳浓度的蜂王浆和壳寡糖添加到稀释液中,
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精液的保存,可以实现精液的异地运输,保证种质资源的合理跨地域利用,具有非常重要的现实意义。本研究采用Uppsala稀释液为基础稀释液,对精液进行了低温保存和冷冻保存,并分别在稀释液中添加不同浓度的蜂王浆和壳寡糖,通过保存后精子活力,活率,质膜完整率,顶体完整率,丙二醛（MDA）水平,过氧化氢酶（CAT）水平和总抗氧化能力等水平的检测,筛选出最佳添加浓度,并将最佳浓度的蜂王浆和壳寡糖添加到稀释液中,通过人工授精和相关基因mRNA水平的测定验证其对精液保存效果的影响。研究结果如下:1.在犬精液低温（4℃）保存过程中,蜂王浆添加浓度为0.8%时,其保存后精子活力,精子活率与对照组差异不显著;顶体完整率,质膜完整率,过氧化氢酶（CAT）水平和总抗氧化能力均有显著提高,丙二醛（MDA）水平显著降低（P<0.05）;壳寡糖添加浓度为0.8mg/ml时,其保存后精子活力与对照组差异不显著;精子活率,顶体完整率,质膜完整率,过氧化氢酶（CAT）水平和总抗氧化能力显著提高,丙二醛（MDA）水平显著降低（P<0.05）;人工授精后受孕率、产仔数和仔犬生长状况与对照组无明显差异。2.在冷冻（-196℃）保存过程中,蜂王浆添加浓度为0.8%时,其解冻后精子活力与对照组差异不显著。精子活率,顶体完整率,质膜完整率,过氧化氢酶（CAT）水平总抗氧化能力显著提高,丙二醛（MDA）水平显著降低（P<0.05）;壳寡糖浓度为0.8mg/ml时,其解冻后精子活力与对照组差异不显著。精子活率,顶体完整率,质膜完整率,过氧化氢酶（CAT）水平总抗氧化能力显著提高,丙二醛（MDA）水平显著降低（P<0.05）;人工授精后受孕率较低,且受孕率、产仔数和仔犬生长状况与对照组无明显差异。3.最佳浓度蜂王浆和壳寡糖单独添加,在低温和冷冻保存1周后,ROS调节因子1（ROMO1）mRNA相对表达量与对照组差异不显著;凋亡相关基因B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）和Bcl-2相关X蛋白（Bax）mRNA相对表达量的比值显著升高;精子顶体相关蛋白-3（SPACA3）mRNA相对表达量显著提高（P<0.05）。
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