【摘 要】
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研究目的:研究PD-L1调控肺腺癌肿瘤微环境中肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）极化促进肺腺癌细胞恶性进展的机制,为靶向PD-L1治疗肺腺癌提供新的理论依据。材料方法:1.构建细胞共培养体系,流式细胞术、ELISA实验检测共培养体系中肺腺癌细胞对TAMs极化的影响,分析αPD-L1逆转TAM/M2极化的能力。2.IL-13、αPD-L1处理RAW264.7细胞制备条件培养基。3.MTT、克隆形成实验检测
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研究目的:研究PD-L1调控肺腺癌肿瘤微环境中肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）极化促进肺腺癌细胞恶性进展的机制,为靶向PD-L1治疗肺腺癌提供新的理论依据。材料方法:1.构建细胞共培养体系,流式细胞术、ELISA实验检测共培养体系中肺腺癌细胞对TAMs极化的影响,分析αPD-L1逆转TAM/M2极化的能力。2.IL-13、αPD-L1处理RAW264.7细胞制备条件培养基。3.MTT、克隆形成实验检测条件培养基处理后肺腺癌细胞的增殖能力。4.流式细胞术检测条件培养基处理后肺腺癌细胞的凋亡能力。5.细胞划痕、Transwell实验检测在条件培养基处理或共培养体系下的肺腺癌细胞迁移及侵袭能力。6.微血管形成、Western Blot实验检测αPD-L1对肺腺癌血管形成能力的影响。7.Western Blot、免疫荧光实验检测αPD-L1对肺腺癌细胞EMT进程的影响。8.Western Blot实验检测αPD-L1逆转TAM/M2极化的相关信号通路标志物表达。结果:1.αPD-L1逆转肺腺癌细胞诱导的TAM/M2极化,但对TAM/M1表型无影响。2.αPD-L1逆转TAM/M2极化,但对肺腺癌细胞增殖及凋亡能力无影响。3.αPD-L1延缓TAM/M2极化诱导的肺腺癌细胞迁移及侵袭。4.αPD-L1逆转TAM/M2极化,抑制肺腺癌血管生成。5.αPD-L1逆转TAM/M2极化,抑制TAM/M2诱导的肺腺癌细胞EMT进程。6.αPD-L1下调共培养体系中TAM/M2的STAT3磷酸化,逆转TAM/M2极化。结论:αPD-L1通过下调TAM/M2的STAT3磷酸化水平,逆转TAM/M2极化,抑制肺腺癌细胞迁移、侵袭、血管生成及EMT进程,但对肺腺癌细胞的增殖和凋亡无影响。
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