Notch信号通路在富集卵巢生殖干细胞的卵巢上皮组织和卵巢生殖干细胞的表达及动态变化

来源 :南昌大学医学院 南昌大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Yxiaowanzi
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:通过探索Notch信号通路相关分子在新生、成年和衰老等不同年龄段小鼠卵巢组织及卵巢生殖干细胞中的表达及动态变化,阐明Notch信号通路在调控卵巢生殖干细胞增殖、分化和衰老中的作用,为解决卵巢功能早衰及相关疾病的防治问题提供理论依据。方法:1.用免疫组织化学、Real-time PCR方法检测生殖细胞标志物MVH和Notch信号通路分子Notch1,Jagged1,Hes1,Hes5在3日龄,2月龄,20月龄小鼠卵巢上皮中的表达及动态变化。2.用免疫荧光双标组织化学法检测生殖细胞标志物MVH和Notch信号分子Notch1,Jagged1,Hes1在3日龄,2月龄,20月龄小鼠卵巢上皮中的共表达及动态变化。3.以STO细胞做饲养层,用两步酶消化法取3日龄小鼠卵巢分离获得单个卵巢生殖干细胞使用添加了LIF、EGF、bFGF等不同细胞生长因子的干细胞培养液在37℃、5%CO2条件下培养。4.用免疫荧光细胞双标记法检测3日龄小鼠卵巢生殖细胞标志物MVH和Notch信号分子Notch1的共表达。结果:1.免疫组织化学结果显示:MVH,Notch1,Jagged1和Hes1蛋白在卵巢上皮组织中有表达,其表达水平于3日龄最高,2月龄次之,20月龄表达水平最弱。2.Real-time PCR结果显示:MVH,Oct-4,Notch1,Hes1和Hes5mRNA在卵巢组织中有表达,其表达水平于3日龄最高,2月龄次之,20月龄表达水平最弱甚至几乎没有。3.免疫荧光双标组织化学法显示:小鼠卵巢生殖细胞标志物MVH和Notch信号分子Notch1,Jagged1和Hes1在卵巢上皮有共表达,MVH/Notch1,MVH/Jagged1,MVH/Hes1共表达强度在3日龄卵巢上皮呈强阳性荧光表达,2月龄卵巢上皮呈阳性表达且弱于3日龄,20月龄卵巢上皮几乎没有表达。4.用两步酶消化法分离卵巢组织得到的细胞,经RT-PCR反应检测到生殖细胞标志物MVH,早期生殖细胞标志物Fragilis,多能干细胞标志物Oct-4的阳性表达,而卵母细胞标志物Zp3未见明显表达。推测分离出的细胞为未分化的生殖干细胞。5.免疫荧光细胞双标记法显示:生殖细胞标志物MVH和Notch通路受体Notch1共表达于卵巢生殖干细胞。结论:富集卵巢生殖干细胞的卵巢上皮组织中存在Notch信号通路相关分子Notch1,Jagged1,Hes1,Hes5mRNA和蛋白表达,并且其表达水平均随着小鼠生殖年龄的增加而减弱;卵巢上皮组织中存在MVH/Notch1,MVH/Jagged1,MVH/Hes1的共表达,共表达水平亦随着小鼠生殖年龄的增加而减弱;卵巢生殖干细胞中亦存在MVH/Notch1的共表达。表明,Notch信号通路可能与卵巢生殖干细胞的增殖、分化和衰老有关。
其他文献
本试验研究了PCR 方法鉴定牛胚胎性别技术,并优化了PCR 反应体系和反应条件,以期该技术能在生产中得到应用。试验结果如下:试验设计合成了4 对牛Y 染色体特异引物B90、B12、B
本文通过对荣华二采区10
期刊
本文通过对荣华二采区10
期刊
1550 nm相干测风激光雷达具有距离和速度分辨率高、人眼耐受性强以及能实现小型化和晴空三维探测的优点,使其在低空安全、气象研究和风能开发等方面具有广泛地应用前景和重要
本文对保幼激素类似物对斜纹夜蛾核多角体病毒增殖的影响进行了研究。文章分别用5×106,1×107,5×107,1×108PIBs/mL四种浓度的SpltNPV感染斜纹夜蛾末龄幼虫(第6龄),并用methopr
本文对稻飞虱种群发生动态与预测进行了研究。文章收集了广东省肇庆市1980-2000年稻飞虱发生的数据,包括灯诱数据、观察圃调查数据以及气象资料,在稻飞虱的种群消长动态、世代
现代逆变技术已经成为人们生产生活的过程中不可或缺的一种技术,他的主要作用就是把市电电网上已经遭受污染的交流电能,或者是从蓄电池、燃料电池、太阳能电池等得到的不稳定电能变换成质量高,谐波污染小,能满足用户对电压和频率要求的交流电能。此技术主要应用于交流电动机的变频调速、不间断电源、有源滤波器、市电电网的无功补偿等,需要将直流电能变换为交流电能的地方。伴随着社会的发展,工业技术的不断提升,越来越多的用
本文通过对荣华二采区10
期刊
本文通过对荣华二采区10
期刊