DJ-1基因在多发性骨髓瘤细胞的表达及临床意义

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目的:探讨DJ-1基因在初诊的多发性骨髓瘤(MM)患者CD138+瘤细胞中的表达情况,并分析DJ-1表达水平与临床的相关性。方法:收集初诊MM患者的骨髓液及正常人外周血,通过密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞(BM-MNCs)和正常人外周血单个核细胞(PB-MNCs)。采用磁珠分选技术,分离BM-MNCs中的CD138+瘤细胞。采用逆转录荧光定量PCR(RTq-PCR)检测CD138+瘤细胞及正常人PB-MNCs的DJ-1 mRNA表达水平;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测相应DJ-1蛋白的表达情况。收集患者的临床信息,分析CD138+瘤细胞中DJ-1 mRNA表达水平与患者分型、初诊时的国际评分系统(ISS)分期、乳酸脱氢酶(LDH)水平的关系。对患者的治疗情况进行随访并评价疗效,分析基线水平的DJ-1 mRNA表达水平与疗效是否相关。结果:1、共收集初诊MM骨髓标本28例,其中成功分选出可供分析的CD138+瘤细胞的有23例。2、MM患者CD138+瘤细胞DJ-1 mRNA相对表达水平=0.197(0.117-0.408)(2-ΔCT,n=23),正常人PB-MNCs DJ-1 mRNA相对表达水平为0.019(0.017-0.021)(2-ΔCT,n=23),差异具有显著统计学意义(P<0.001),并经DJ-1蛋白检测验证;3、男性和女性MM患者CD138+细胞内DJ-1 mRNA相对表达水平分别为0.232(0.095-0.511)(2-ΔCT,n=16),0.197(0.133-0.307)(2-ΔCT,n=7),差异无统计学意义(P=0.764);≧65岁和<65岁MM患者CD138+细胞内dj-1mrna相对表达水平分别为0.285(0.164-0.408)(2-Δct,n=10),0.168(0.112-0.307)(2-Δct,n=13),差异无统计学意义(p=0.336);4、igg型和iga型mm患者cd138+细胞内dj-1mrna相对表达水平分别为0.178(0.133-0.510)(2-Δct,n=10),0.273(0.095-0.408)(2-Δct,n=9),差异无统计学意义(p=0.806)。同样,轻链κ型与λ型的mm患者cd138+细胞内dj-1mrna相对表达水平分别为0.249(0.112-0.558)(2-Δct,n=12),0.192(0.117-0.307)(2-Δct,n=11),差异无统计学意义(p=0.460)5、mm患者cd138+细胞内dj-1mrna相对表达水平在issi+ii期和iii期分别为0.273(0.164-0.343)(2-Δct,n=11),0.192(0.117-0.307)(2-Δct,n=11);6、初诊时issi+ii和iii期患者ldh(u/l)水平分别为138.1(124.8-197)(u/l,n=10),171.8(126-214.5)(u/l,n=7),dj-1mrna相对表达量(2-Δct)与ldh相关系数为0.458(n=17);7、化疗2周期后疗效达部分缓解及以上(≥pr)的患者和未达pr的患者,其基线dj-1mrna相对表达水平分别为0.51(0.117-0.558)(2-Δct,n=5),0.273(0.112-0.307)(2-Δct,n=7)。结论:1、mm患者cd138+瘤细胞dj-1表达水平异常增高;2、mm患者cd138+瘤细胞dj-1mrna表达水平与患者的性别、是否大于65岁、疾病分型不相关;3、由于病例数少,随访观察时间短,mm患者cd138+瘤细胞dj-1mrna表达水平与与初诊时患者的疾病分期、ldh水平、疗效的关系尚不确定,需要进一步研究。
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