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目的:肾小管间质纤维化(tubulointerstitial fibrosis,TIF)是终末期肾病的重要病理特征,并与慢性肾病预后密切相关。最近研究表明肾小管上皮细胞间充质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)是肾小管间质纤维化发生发展的重要机制。肾脏局部肾素-血管紧张素系统(RAS)激活在慢性肾脏疾病的进展中起十分重要的作用。血管紧张素II(AngⅡ)作为其中最为重要的效应物质,不仅通过受体1途径调节肾单位血流动力学,而且对肾脏固有细胞增殖、分化、胞外基质重塑有重要的影响,但是其作用机制仍是国内外研究的热点。本研究通过单侧输尿管梗阻(UUO)模型观察AngⅡ1型受体拮抗剂厄贝沙坦(Irbesartan, Irb)对肾组织结缔组织生长因子(connective tissue growth factor, CTGF)和整合素连接激酶(integrin-linked kinase, ILK)表达的影响,并探讨其与肾小管上皮间充质转化的关系。方法:将清洁级、健康雄性CD-1小鼠(10周龄、18-22克)随机分为三大组,假手术组(C,N=20)、单侧输尿管结扎组(UUO,N=40)和Irbesartan干预组(UUO+Irb,N=40)。分别在手术后1,3,7,14天处死小鼠,留取标本。测定血清肌酐值评估小鼠肾功能。Masson染色观察肾组织基本结构及间质纤维化程度。免疫组化检测小鼠肾组织CTGF、ILK、上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin)和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达,Western印迹观察小鼠肾组织CTGF、ILK蛋白表达,荧光实时定量RT-PCR(real-time RT-PCR)检测CTGF、ILK、E-cadherin、α-SMA和纤维连接素(Fibronectin,FN) mRNA表达。结果:UUO组术后7天肾间质纤维化形成[(19.73±1.67)% vs. (2.00±0.33)% , P<0.01] ;14天纤维化面积进一步扩大[(32.60±1.83)% vs.(1.48±0.58)% , P<0.01]。与UUO组相比,Irb治疗组肾小管间质损伤程度明显减轻[7天(15.11±1.37)%;14天(28.46±1.07)%]。与假手术组相比,UUO组术后1天起CTGF和ILK mRNA及蛋白表达均增高,Irb治疗组CTGF和ILK表达均被显著抑制(P分别<0.01)。术后3天,UUO组E-cadherin mRNA及蛋白表达较对照组明显减少,而Irb治疗组E-cadherin表达较UUO组增高(P<0.01);同时α-SMA mRNA及蛋白表达显著增加,Irb治疗组显著抑制其表达(P<0.01);UUO组FN mRNA表达于术后3天较对照组显著增加,Irb治疗组FN表达较UUO组显著减少(P<0.01)。Western Blot结果显示,术后1-7天,ILK蛋白表达与CTGF蛋白表达呈正相关(r=0.97, P<0.01);根据免疫组化结果,术后1-14天,CTGF蛋白表达与α-SMA蛋白表达呈正相关(r=0.87, P<0.01),与E-cadherin蛋白表达呈负相关(r=-0.94, P<0.01);术后1-7天,ILK蛋白表达与α-SMA蛋白表达呈正相关(r=0.88, P<0.01),与E-cadherin蛋白表达呈负相关(r=-0.87, P<0.01)。结论:1.在单侧输尿管梗阻(UUO)肾间质纤维化形成过程中,肾小管上皮细胞发生了上皮-间充质转化。2.在UUO模型早期,肾小管上皮细胞表达CTGF和ILK增多,且与肾小管上皮细胞表型改变有一定的时空关系,推测CTGF和ILK可能参与了EMT过程。