Snail在鼻咽癌细胞上皮-间质转化及“干性”表型获得中的作用(临床硕士科学学位)

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目的:肿瘤细胞“干性”的获得在许多类型的肿瘤中均被证实参与了包括鼻咽癌在内的多种肿瘤的侵袭和转移过程,目前研究表明,肿瘤细胞“干性”的获得与上皮-间质转化有密切关系,而肿瘤细胞在发生上皮-间质转化的同时也伴随着肿瘤细胞“干性”的获得,两者相辅相成。Snail作为E钙粘蛋白的抑制因子,在调控EMT过程发生的同时,它也调节肿瘤细胞“干性”的获得。我们目前研究的主要目的是探讨转录因子 Snail在人鼻咽癌细胞EMT及“干性”表型获得过程中的调控作用。  方法:在本项研究中,首先,我们使用了慢病毒转染的方法构建过表达 Snail基因的CNE2细胞;然后,采用qRT-PCR和Western blot技术分别检测EMT过程中的标记分子;接着,使用上述两种实验方法检测肿瘤细胞“干性”相关生物标记分子的基因表达和蛋白表达。流式细胞术用来检测CD44+CNE2、CD133+CNE2和CD44+CD133+CNE2细胞数占总CNE2细胞数的比例。肿瘤细胞“干性”相关的生物学特性主要由体外成球实验和克隆形成实验来验证,细胞的侵袭及转移能力使用Transwell和划痕实验来检测,而异体移植瘤实验用来评价裸鼠的体内肿瘤形成能力。  结果及结论:在人鼻咽癌细胞系CNE2中过表达Snail会诱导人鼻咽癌细胞发生EMT及肿瘤细胞“干性”的获得并增强细胞的侵袭转移能力,且过表达 Snail还会增强裸鼠体内的成瘤能力。而肿瘤细胞“干性”特性的获得是目前鼻咽癌因放疗抵抗从而治疗失败的主要原因之一,故Snail可作为鼻咽癌潜在的治疗靶点。
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