【摘 要】
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在我国,酪蛋白磷酸肽（CPP）作为一种营养强化剂被广泛地添加到乳粉中,特别是婴幼儿乳粉中,在国标GB 14880-2012中规定了CPP的添加限量。随着我国对配方乳粉尤其是婴幼儿配方乳粉的要求越来越严格,建立一种高效的CPP检测手段是监测添加量的关键。本论文以提取率为指标,从提取方式、检测方法两个方面优化了CPP的检测限。本研究以水作为CPP的提取剂,通过超声辅助提取,再将提取液用盐酸溶液调节p
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在我国,酪蛋白磷酸肽（CPP）作为一种营养强化剂被广泛地添加到乳粉中,特别是婴幼儿乳粉中,在国标GB 14880-2012中规定了CPP的添加限量。随着我国对配方乳粉尤其是婴幼儿配方乳粉的要求越来越严格,建立一种高效的CPP检测手段是监测添加量的关键。本论文以提取率为指标,从提取方式、检测方法两个方面优化了CPP的检测限。本研究以水作为CPP的提取剂,通过超声辅助提取,再将提取液用盐酸溶液调节p H至4.6,在酸性条件下沉淀蛋白,离心,将上清液用含有0.5%甲酸-乙腈溶液定容至100 m L后,经过0.22μm水膜进行过滤,再经液相色谱-串联质谱仪分离测定,外标法对CPP进行定量。利用四极杆-飞行时间串联质谱仪（QTOF）确立了两条特异性肽段,建立了以HPLC-MS/MS法来测定乳粉中的酪蛋白磷酸肽含量的方法。通过对HPLC-MS/MS检测方法的回收率、精密度、线性范围、基质效应进行评价,验证了本方法的可行性。通过绘制CPP的标准曲线,得到了CPP线性范围为5～100μg/m L,相关系数R~2在0.9991～0.9997之间,本研究的定量限为100mg/kg,对不含CPP的空白样品进行加标回收测试验证方法的回收率,结果证明乳粉样品中CPP的平均回收率的范围为79.7%～97.3%之间,平均加标回收率为87.7%,相对标准偏差RSD范围为2.2%～12.2%之间。试验结果表明,该方法具有提取效率高、操作简便、分析时间短、定性定量准确、可信度高等优点,为检测不同厂家的乳粉中的酪蛋白磷酸肽提供了可靠的技术支持,具有潜在的应用前景。
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