论文部分内容阅读
研究背景肥胖是一种由环境和遗传等多种因素共同作用导致的慢性代谢疾病,其本质主要是机体胰岛素抵抗及能量代谢平衡机制紊乱,导致体内脂肪组织堆积过多和(或)分布异常。IP6K1是磷酸肌醇激酶家族成员之一,广泛存在于真核细胞内,参与多种生命活动。近来研究发现,IP6K1还与肥胖、2型糖尿病等疾病的发生发展有着密切关系。IP6K1可以通过AKT/PKB信号通路与AMPK信号通路影响机体胰岛素抵抗、能量代谢等作用。但目前国内外有关IP6K1的研究主要集中在分子机制方面,在肥胖患者中的研究尚存在空缺,另外IP6K1与脂联素的关系也缺乏具体研究。探讨IP6K1在肥胖发生发展中的意义,通过分析血清IP6K1与糖脂代谢评价指标及脂联素的相关性,以期探讨IP6K1在肥胖及其相关代谢疾病的病理生理作用机制。研究目的1.观察超重/肥胖患者与正常对照人群血清IP6K1的表达差异,以及IP6K1与糖脂代谢及脂联素的相关性。2.在细胞水平明确IP6K1是如何调控脂联素的表达的。研究方法1.本研究共纳入67例研究对象,采用统一的调查问卷收集入组者的基本信息并进行体格检查,测量入组者的身高、体重、腰围、臀围等指标,根据测量结果计算体重指数以及腰臀比。然后,采取肘前静脉血液标本2份血,一份采用酶联免疫吸附法用于IP6K1和脂联素水平的检测,另一份血标本用于检测常规生化指标。观察结果两组指标差异,以及IP6K1与各生化指标及脂联素的相关性。2.诱导3T3L1前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞,用油红O染色法鉴定细胞的分化情况;在分化成熟的细胞内,干预IP6K1的表达,并用RT-PCR和Western Blot检测IP6K1、脂联素、PPARγ的表达;再通过干预PPARγ表达,验证IP6K1是通过PPARγ来调控脂联素的。研究结果1.超重/肥胖组血清IP6K1浓度为正常对照组的1.20倍,血清脂联素浓度为正常对照组的0.78倍(均P<0.05)。2.血清IP6K1浓度与BMI、腰围、腰臀比、空腹血糖、空腹C肽、糖化血红蛋白、ALT素呈正相关,与HDL-C、脂联素呈负相关。其中,HDL-C、脂联素是IP6K1的独立影响因素(均P<0.05)。3.预测超重/肥胖的血清IP6K1浓度临界值是0.062ng/ml,ROC曲线下面积(AUC)为 0.646(95%CI 0.581-0.737,P<0.05),其检测敏感性为 90.3%,特异性为38.9%。4.过表达IP6K1之后,RT-PCR、Western Blot均显示脂联素和PPARγ的表达受到抑制;相反,抑制IP6K1之后,脂联素和PPARγ的表达增加。5.与过表达IP6K1的细胞相比,同时过表达了 IP6K1和PPARγ的细胞中脂联素表达增加。研究结论1.超重/肥胖人群血清中的IP6K1比年龄、性别相匹配的正常人群高。2.IP6K1与BMI、腰围、腰臀比、空腹血糖、空腹C肽、糖化血红蛋白、ALT素呈正相关,与HDL-C、脂联素呈负相关。HDL-C、脂联素是IP6K1的独立影响因素。3.在脂肪细胞中,IP6K1与PPARγ和脂联素是呈负相关的,并且IP6K1可能是通过抑制PPARγ的表达来抑制脂联素的表达的。