新城疫(Newcastle Disease, ND)是对养禽业危害最大的烈性传染病之一,而新城疫活疫苗是预防该类传染病的主要疫苗之一。在我国的禽用疫苗中,冻干弱毒疫苗占相当大的比例。目前国内疫苗生产企业常用的保护剂主要是蔗糖、牛奶、明胶等,组方简单,保护性能较差。如果在2-8℃条件下,保存期只有3-6个月,常需要在-15℃以下保存。而国内传统的动物用疫苗保护剂的研制相对滞后,使疫苗的长期保存和长途运输受到很大限制,加上基层防疫部门缺乏必要的冷冻和冷藏设施,容易因免疫失败而造成疫病流行。发达国家已基本采用新型耐热冻干保护剂生产冻干疫苗,但其研究和应用属于专利资料,一直处于保密状况中。我国在耐热冻干保护剂方面的研究起步较晚,虽取得了一定的成果,但仍未达到全面推广应用。随着中国加入WTO,我国畜牧业的快速发展使得对疫苗的使用量和种类迅速增加,加上中国市场巨大,国外生物制品纷纷涌入,市场竞争加剧,研究和应用高效耐热冻干保护剂尤为迫切。为解决国产鸡新城疫冻干苗在2-8℃条件下保存期短及可能造成的免疫失败等问题,本试验以NDV Clone30弱毒为对象,采用正交试验和单因子试验相结合,对耐热保护剂的组成、混合比例以及最佳冻干曲线进行探索。通过初步筛选,优选出C8、14、38三组保护剂配方及其比例。将三种保护剂应用于鸡新城疫弱毒Clone 30疫苗生产中,发现耐热保护剂组冻干前后病毒损失轻微,对照组损失在100.5EID50以内。且耐热性试验(耐老化试验)、保存期试验结果均较对照组好。通过对初筛选冻干曲线的适当调整,优选出冻型良好、冻干时间较短的曲线做为鸡新城疫活疫苗的冻干曲线,曲线全长约40小时。采用该曲线冻干耐热组及对照组疫苗,优选出适合该曲线的2组保护剂,即C8和38。37℃保存期试验中,保存3周C8和38病毒损失分别为15.7%和16.2%,而对照组保存两周损失达37.8%。室温保存试验中,保存30天两个耐热组分别损失7.9%和10.1%,而对照组保存20天损失达24.1%。2-8℃保存9个月,病毒损失轻微。综合以上结果,可以看出C8和38两组保护剂冻干鸡新城疫病毒,在疫苗的各种保存期试验中均表现了与常规冻干疫苗更稳定的耐热性能,显示出良好的应用前景。本研究对ND疫苗的传统生产工艺进行了革新,对降低生产成本提高产品质量具有重要的意义,同时本研究将为新兽药生物制品规程的申报提供可复核的科学依据。