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目的:探讨葛根及其配伍对糖尿病心肌病心肌纤维化的作用机制。
方法:1.实验一:选取8周清洁级SD雄性大鼠90只,随机分成模型组、空白组,大鼠模型组主要采取以单日空食,双日高脂高糖饲料,饥饱失衡的喂养方法进行8周饲养,并在高脂高糖饲养的第四周,进行50mg/kg链脲佐菌素(STZ)一次性无菌注射大鼠腹腔部,建造DCM大鼠模型。在建模成功后检测大鼠体重和血糖,并对大鼠的正常状态进行观测,采用ELISA法检测大鼠心肌肌钙蛋白,同时通过心肌组织细胞Masson染色,观察大鼠心肌组织纤维变化。
2.实验二:将实验一中8只空白组大鼠继续为实验二所使用,并把建模成功后的大鼠随机分为葛芪参蒌组、模型组、葛根组、葛参组、达美康组、葛芪组、葛蒌组各8只,分别使用药物或生理盐水来进行各组大鼠灌胃处理,且在九周后,分别检测各组大鼠甘油三酯(TG)、血糖、总胆固醇(TC),采用ELISA法检测大鼠心肌AngII,采用免疫组化法检测AQP1、AQP3。
结果:1.使用单日空食、双日高脂高糖饲料进行交错喂养,合并腹腔部注射STZ的SD大鼠同大鼠空白组相较,cTn、TG、TC及血糖值均升高显著,统计学有意义(P<0.05),模型组同空白组相较体重降低显著(P<0.01),模型组大鼠背皮部出现瘀青斑点,尾巴颜色加重呈瘀斑色,体重持续下降,且有眯眼、扎推蜷缩、弓背情况出现,出现进食、饮水明显增加,粪质粘滞较重,同时大部分心肌组织被纤维化所取代,心肌胶原纤维出现增生现象,纤维组织呈网状结构将肌束分隔进行包绕。
2.药物进行干预后,各药物组同模型组相较,SD大鼠血糖值均有所下降,具有统计学意义(P<0.001、P<0.01),且葛芪参蒌组、葛芪组血糖浓度值同其它中药组相较,明显较低,存在差异(P<0.05)。
3.药物进行干预后,各药物组同模型组相较,TC、TG值显著减少,差异明显,统计学有意义(P<0.001),且葛芪参蒌组作用要胜于其它各组。
4.药物进行干预后,各药物组对大鼠心肌AQP1、AQP3均有调控作用,但对于升高AQP1平均密度值,以葛参组疗效最好,而升高AQP3平均密度值,则以葛蒌组疗效最好。
5.药物进行干预后,各药物组同模型组大鼠心肌AngII值相较,均有所下降,存在差异(P<0.001),但以葛芪参蒌组疗效最好。
结论:1.采用单日空食、双日高脂高糖饲料交错的方式进行喂养,且合并腹腔部注射STZ,可使DCM大鼠造模取得较大的成功率。
2.痰浊血瘀是导致DCM心肌纤维化的关键病因。
3.AngII、AQP1和AQP3可能是DCM心肌纤维化的关键指标。
4.葛根及其配伍可以降低DCM大鼠血糖、血脂,其机制可能与其有扩张血管,祛痰除瘀的作用有关。
5.葛根及其配伍可能通过活血行水、布散津液、消除痰湿的作用来升高DCM大鼠AQP1、AQP3的平均光密度值,从而达到改善心肌纤维化的目的。
6.葛根及其配伍可能通过活血化瘀的作用来降低DCM大鼠AngII值,从而达到改善心肌纤维化的目的。
方法:1.实验一:选取8周清洁级SD雄性大鼠90只,随机分成模型组、空白组,大鼠模型组主要采取以单日空食,双日高脂高糖饲料,饥饱失衡的喂养方法进行8周饲养,并在高脂高糖饲养的第四周,进行50mg/kg链脲佐菌素(STZ)一次性无菌注射大鼠腹腔部,建造DCM大鼠模型。在建模成功后检测大鼠体重和血糖,并对大鼠的正常状态进行观测,采用ELISA法检测大鼠心肌肌钙蛋白,同时通过心肌组织细胞Masson染色,观察大鼠心肌组织纤维变化。
2.实验二:将实验一中8只空白组大鼠继续为实验二所使用,并把建模成功后的大鼠随机分为葛芪参蒌组、模型组、葛根组、葛参组、达美康组、葛芪组、葛蒌组各8只,分别使用药物或生理盐水来进行各组大鼠灌胃处理,且在九周后,分别检测各组大鼠甘油三酯(TG)、血糖、总胆固醇(TC),采用ELISA法检测大鼠心肌AngII,采用免疫组化法检测AQP1、AQP3。
结果:1.使用单日空食、双日高脂高糖饲料进行交错喂养,合并腹腔部注射STZ的SD大鼠同大鼠空白组相较,cTn、TG、TC及血糖值均升高显著,统计学有意义(P<0.05),模型组同空白组相较体重降低显著(P<0.01),模型组大鼠背皮部出现瘀青斑点,尾巴颜色加重呈瘀斑色,体重持续下降,且有眯眼、扎推蜷缩、弓背情况出现,出现进食、饮水明显增加,粪质粘滞较重,同时大部分心肌组织被纤维化所取代,心肌胶原纤维出现增生现象,纤维组织呈网状结构将肌束分隔进行包绕。
2.药物进行干预后,各药物组同模型组相较,SD大鼠血糖值均有所下降,具有统计学意义(P<0.001、P<0.01),且葛芪参蒌组、葛芪组血糖浓度值同其它中药组相较,明显较低,存在差异(P<0.05)。
3.药物进行干预后,各药物组同模型组相较,TC、TG值显著减少,差异明显,统计学有意义(P<0.001),且葛芪参蒌组作用要胜于其它各组。
4.药物进行干预后,各药物组对大鼠心肌AQP1、AQP3均有调控作用,但对于升高AQP1平均密度值,以葛参组疗效最好,而升高AQP3平均密度值,则以葛蒌组疗效最好。
5.药物进行干预后,各药物组同模型组大鼠心肌AngII值相较,均有所下降,存在差异(P<0.001),但以葛芪参蒌组疗效最好。
结论:1.采用单日空食、双日高脂高糖饲料交错的方式进行喂养,且合并腹腔部注射STZ,可使DCM大鼠造模取得较大的成功率。
2.痰浊血瘀是导致DCM心肌纤维化的关键病因。
3.AngII、AQP1和AQP3可能是DCM心肌纤维化的关键指标。
4.葛根及其配伍可以降低DCM大鼠血糖、血脂,其机制可能与其有扩张血管,祛痰除瘀的作用有关。
5.葛根及其配伍可能通过活血行水、布散津液、消除痰湿的作用来升高DCM大鼠AQP1、AQP3的平均光密度值,从而达到改善心肌纤维化的目的。
6.葛根及其配伍可能通过活血化瘀的作用来降低DCM大鼠AngII值,从而达到改善心肌纤维化的目的。