【摘 要】
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该文旨在构建新生隐球菌Cryptococcus neoformans(C.neoformans)荚膜缺陷株的转化系统.研究工作包括(1)在C.neoformans的荚膜缺陷株cap60中筛选到一个尿嘧啶合成基因URA5基
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该文旨在构建新生隐球菌Cryptococcus neoformans(C.neoformans)荚膜缺陷株的转化系统.研究工作包括(1)在C.neoformans的荚膜缺陷株cap60中筛选到一个尿嘧啶合成基因URA5基因突变株(ura5);(2)对质粒pCntell扩增得到衍生质粒pCntell-d并对它进行鉴定;(3)以C.neoformans URA5基因为选择标记的质粒载体pCntell-d分别用电转化法、化学法均成功地转化了ura5基因突变株;(4)经质粒稳定性检测和Southern分子杂交分析表明质粒载体pCntell-d在C.neoformans cap60 ura5菌株中能以整合和游离两种状态存在.以上结果表明作者建立了新生隐球菌荚膜缺陷株的转化系统,为进一步克隆有关致病基因的工作提供了基础.另外,该文还取得如下结果:(1)测定了C.neoformans cap60及荚膜野生型菌株RV51076、RV45980的G418基因抗性;(2)利用C.neoformans URA5基因作为选择性标记构建通用型质粒pEGU并证明能在新生隐球菌中使用.
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