联合用药下硝基呋喃代谢物在鲫鱼体内的残留与消除规律研究

来源 :浙江海洋大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tanxiaoxi
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我国是水产品养殖大国,水产养殖年产量超过捕捞量。但近年来,一些养殖户非法使用禁用渔药和化学抗生素,甚至多种药物联合使用以治疗复杂性鱼病,在提高了经济效益的同时,造成了水产养殖动物体内药物残留严重,生态环境也被污染,逐渐形成恶性循环。硝基呋喃类药物是一种广谱抗菌素,作为渔药可以治疗多种细菌性鱼病,其代谢物可以在水产动物体内长期残留,具有潜在的三致作用,已被许多国家列为禁用药物。然而,水产品中硝基呋喃代谢物残留检测超标的情况仍然时有发生,因此对硝基呋喃类药物的监管不能松懈,同时由于养殖户的联合用药和生态环境的复杂性,了解联合用药下硝基呋喃类药物在水产动物体内的残留与消除规律很有必要。本课题以鲫鱼为研究对象,建立了适用于鲫鱼体内四种硝基呋喃代谢物残留的检测方法,探究单独给药和联合给药下硝基呋喃代谢物在鲫鱼体内残留与消除规律,并分析不同渔药参与下鲫鱼体内呋喃唑酮代谢物残留与消除规律,主要研究内容如下:1、建立了满足鲫鱼体内四种硝基呋喃代谢物的残留检测方法。方法采用恒温超声辅助衍生,选择最佳提取p H,利用PSA和正己烷分两步将内脏样品除脂净化,高效液相色谱-串联质谱测定,内标法定量。该方法下,四种硝基呋喃代谢物在1.0~100.0 ng/m L浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数R2均大于0.999,检测限和定量限分别为0.25μg/kg和0.50μg/kg。在1.0μg/kg、5.0μg/kg、10.0μg/kg的加标水平下,四种硝基呋喃代谢物在鲫鱼肌肉、肝脏、肾脏的平均回收率在91.34%~107.31%之间,相对标准偏差为1.44%~7.89%之间。结果表明,该方法灵敏度高,重复性好,可为鲫鱼体内硝基呋喃代谢物残留检测提供技术支持。2、以鲫鱼为实验对象,应用药浴给药的方式饲养鲫鱼,在药浴结束后的不同时间点取鲫鱼肌肉,HPLC-MS/MS法分析测定鲫鱼肌肉中硝基呋喃代谢物的残留量。结果发现:在相同的消除时间内,四种硝基呋喃类药物在单独和联合给药时,其代谢物在鲫鱼肌肉中呈现不同的残留和消除规律,其中AOZ的残留和消除变化最为明显,联合给药时AOZ在鲫鱼肌肉中的最大残留量和平均消除速率分别为23.37μg/kg、0.14μg·(kg·h)-1,而单独给药时AOZ的最大残留量和平均消除速率仅为12.40μg/kg、0.09μg·(kg·h)-1。由于AOZ在单独和联合给药两种不同的给药方式下,残留消除规律表现出很大的差异,将FZD分别与NFZ、FTD、NFT联合给药后,分析其他三种药物对鲫鱼体内AOZ残留的影响,结果发现,联合给药时FTD对鲫鱼体内AOZ残留量影响最大,FZD与FTD联合用药组中AOZ的最大残留量为30.52μg/kg,是对照组的2.03倍。3、基于前一章发现AOZ在四种硝基呋喃药物单独和联合给药下残留消除规律不同,考虑到实际养殖环境中可能存在多种渔药残留,采用药浴给药,在药浴结束后的不同时间点取鲫鱼肌肉、肾脏、肝脏,分析鲫鱼体内AOZ的残留量,进一步探究不同渔药参与下FZD代谢物AOZ在鲫鱼体内的残留与消除。结果发现,六种渔药(氯霉素、土霉素、恩诺沙星、磺胺间甲基嘧啶、甲基睾酮、己烯雌酚)分别与FZD联合用药后,AOZ在鲫鱼肌肉、肾脏、肝脏中残留与消除均会受到不同程度的影响。其中土霉素和恩诺沙星对鲫鱼体内AOZ的残留和消除受影响较大,FZD分别与土霉素、恩诺沙星联合给药后鲫鱼肌肉、肾脏、肝脏中AOZ的最大残留浓度表现为28.69μg/kg、152.46μg/kg、125.19μg/kg;6.98μg/kg、40.70μg/kg、41.64μg/kg,约为对照组的2.13、1.86、2.11倍;0.65、0.84、0.46倍,平均消除速率分别为0.33μg·(kg·h)-1、1.71μg·(kg·h)-1、1.23μg·(kg·h)-1;0.08μg·(kg·h)-1、0.30μg·(kg·h)-1、0.44μg·(kg·h)-1,约为对照组的2.36、1.20、2.37倍;0.57、0.35、0.85倍。
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