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背景:刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)是专性有核细胞内寄生原虫,具有机会致病性,拥有例如众多哺乳动物,鸟类以及人类等十分广泛的宿主。弓形虫病呈世界性分布,是一种严重危害人类健康的人兽共患寄生虫病。先天性弓形虫病是人类先天畸形、神经缺陷、智力低下、死胎、早产的重要原因之一,普遍认为胎盘的损伤是引起弓形虫病的重要因素。目的:通过检测弓形虫体内感染导致胎盘氧化还原失衡与凋亡水平的变化,探讨先天性弓形虫病相关机制,为胎盘病理损伤和治疗相关疾病提供依据。方法:以受孕SPF级ICR小鼠为研究对象,随机分2组:1、正常对照组,2、WH-3株弓形虫感染组。于孕8天,感染组每只小鼠腹腔注射弓形虫毒株(WH-3株)速殖子200个/0.1mL生理盐水,对照组腹腔注射0.1mL生理盐水。孕12、14、16天分批随机颈椎脱臼处死孕鼠。孕鼠处死后,小心剥离取出胎盘,按照实验程序,制作细胞悬液用于流式细胞检测。另外,取部分胎盘液氮冻存。按照检测试剂盒操作说明,分别检测丙二醛(MDA),谷胱甘肽(GSH),8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)水平的变化。流式细胞仪检测凋亡水平和活性氧簇ROS水平的变化。结果:(1)感染小鼠在孕14天后开始出现感染症状,多数在16天后开始死亡。(2)检测结果显示,实验组和正常对照组相比,孕鼠胎盘匀浆液MDA和8-OHdG含量随妊娠天数的增加而升高,GSH含量随妊娠天数的增加而降低。妊娠第12天和第14天时,实验组与正常对照组结果比较,MDA和8-OHdG含量分别从对照组的2.52±0.42 ug/gprot(12天)、2.57±0.44 ug/gprot(14天);0.91±0.26ug/gprot(12天)、0.98±0.26ug/gprot(14天)升高到3.13±0.57 uM/gprot(12天)、3.92±0.86 uM/gprot(14天);1.12±0.17ug/gprot(12天)、2.65±0.45ug/gprot(14天)(p<0.05)。GSH含量从正常对照组的9.87±1.35 uM/gprot(12天)、9.88±1.37uM/gprot(14天)降低到8.7±1.33uM/gprot(12天)、6.3±1.2 uM/gprot(14天)(p<0.01)。(3)流式细胞检测分析,弓形虫感染导致胎盘滋养细胞的凋亡水平随妊娠天数的增加明显增加。孕12天,总凋亡率,早期凋亡率和晚期凋亡率分别从正常对照组的27.1±3.8%,14.0±2.7%和13.1±2.9%上升到42.0±7.16%,24.8±6.7%和17.2±2.30%;孕14天,总凋亡率,早期凋亡率和晚期凋亡率分别从正常对照组的27.5±8.3%,14.6±3.3%和12.8±6.3%上升到61.2±9.8%,27.0±4.1%和34.2±12.8%。流式检测ROS含量,孕12天感染组对正常对照组平均荧光强度分别为1034±132 vs1091±109(p<0.01);孕14天感染组对正常对照组平均荧光强度分别为1036±121 vs2071±67(p<0.01),均有显著性差异。(4)在0.5mM/L apocyninNADPH氧化酶特异的抑制剂处理组ROS可观察到明显减少。通过比色或免疫印迹的方法检测caspase-9,caspase-8和caspase-3的活性。研究发现,弓形虫感染组caspase-9和caspase-3的活性比caspase-8要高。结论:孕期WH-3弓形虫速殖子感染导致胎盘局部氧化应激损伤,最终引起滋养细胞的凋亡水平明显升高。氧化损伤可能是中国弓形虫分离株先天性致畸的机制之一。