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臭氧是一种强氧化剂,具有加速糖酵解、影响红细胞和血流变、杀灭细菌及真菌、抑制病毒、调节免疫、止痛等生物学作用,它作为一种治疗方法已经有约一个世纪的历史了,但其应用现今仍存在着较大争议,每年都有大量的病人在进行臭氧治疗,所以这个问题应尽快解决。臭氧具有破坏呼吸系统功能、遗传损坏等毒性,而实际这么多年来一直没有严重并发症的报道,其实臭氧跟其他化学药物一样,只要应用得当就不会有副作用,关键就是应用浓度,国外有报道臭氧安全应用浓度为1ug/ml～40ug/ml,同时有报道血液中臭氧治疗浓度在80ug/ml以下,未发现高铁血红蛋白,溶血也低于1.0%。综合各资料可以得出,每种组织对臭氧的耐受是不一样的。本实验主要是根据目前临床应用臭氧治疗情况,选取新西兰大白兔作为实验动物,观察中浓度和高浓度臭氧对兔正常组织的急性和亚急性反应情况,初步探讨关节、肌肉及椎管内组织对不同浓度臭氧的耐受能力,为进一步的研究提供基础资料,为临床治疗提供实验依据。研究方法：44只新西兰大白兔,随机取出2只切取膝关节软骨、关节囊、小腿三头肌、脊髓及硬脊膜作为正常对照组,随机取出24只分为中浓度50ug/ml臭氧和高浓度80ug/ml臭氧两大组,每大组再随机分为6小组,分别在兔膝关节内、小腿三头肌注射臭氧后1天、3天、1周、2周、1周、2周时切除兔膝关节软骨、关节囊及小腿三头肌,其中第5、6组兔膝关节内重复注射1次臭氧(间隔3天),切取组织；剩余18只大白兔随机分为中浓度50ug/ml臭氧和高浓度80ug/ml臭氧两大组,每大组再随机分为3小组,分别在椎管内注射臭氧后1天、3天、1周时切除兔脊髓及硬脊膜。所有切取组织均石蜡包埋,伊红-苏木素(HE)染色,在光镜下观察对比不同浓度臭氧对同一组织结构的影响以及在不同时间点组织的变化。结果：高中浓度组关节软骨及软骨膜均完整,两组滑膜无明显变化,关节软骨HE染色随时间由红色逐渐变为蓝色,中浓度组至2周时完全恢复,高浓度组未能完全恢复,第2组和第5组比较无明显差异；高浓度臭氧1、2、3、5组出现肌纤维变性坏死,并依次加重,2、3、5组出现炎症反应,第4、6组肌纤维形态接近正常。中浓度1、2、3、4、6组肌纤维形态接近正常,第5组出现炎症反应；50ug/ml臭氧使硬脊膜结构疏松,变薄；80ug/ml臭氧使硬脊膜纤维断裂,厚度变薄明显。结论：高中浓度臭氧均能加速关节软骨蛋白多糖降解,高浓度80ug/ml组关节软骨恢复时间长于中浓度50ug/ml组,关节内重复注射与单次注射臭氧对关节破坏无明显差异；80ug/ml臭氧对肌组织具有明显破坏性,不宜用于临床治疗,50ug/ml臭氧对肌组织具有潜在破坏性,建议臭氧临床应用浓度低于50ug/ml;80ug/ml臭氧对硬脊膜具有明显的破坏性,50ug/ml臭氧相对安全,建议椎管内注射臭氧浓度低于50ug/ml。