香芩解热颗粒对肥胖小鼠脂质代谢的调节作用及机制探究

来源 :云南中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhengjunzhe
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目的 通过构建谷氨酸钠(monosodium glutamate,MSG)肥胖小鼠模型和高脂饮食(High fat diet,HFD)肥胖小鼠模型,探究香芩解热颗粒(Xiangqin Jiere Granule,XQ)对不同因素诱导肥胖模型小鼠脂质代谢的改善作用及其可能的作用机制。方法 第一部分:通过对新生Balb/c小鼠出生后第2~8天皮下注射谷氨酸钠溶液(3mg/kg),构建MSG肥胖小鼠模型。对照组(Control组)皮下注射等量生理盐水,21日龄后离乳,筛选出雄性小鼠并分筐饲养,待小鼠12周龄时按体重随机分为谷氨酸钠肥胖模型组(MSG组)、香芩解热颗粒低剂量组(XQ4.5组,4.5g/kg)和高剂量组(XQ22.5组,22.5g/kg)。XQ4.5组和XQ22.5组灌胃给予相应剂量的香芩解热颗粒,Control组和MSG组灌胃给予等量生理盐水,连续灌胃5周,每周监测各组小鼠体重、腹围和摄食量。给药结束后禁食不禁水12h,测量小鼠禁食体重、腹围、体长,并计算Lee指数;准确称量小鼠内脏脂肪重、肝脏组织重和胸腺组织重,并计算内脏脂肪百分比、肝脏指数和胸腺指数;采用试剂盒检测小鼠血清中的TG、TC和LDL-C水平,以及小鼠肝脏组织中的TG、TC、LDL-C和HDL-C水平;采用RT-q PCR技术检测小鼠肝脏组织中脂肪代谢酶ACC1、FAS、DGAT1和HTGL的基因表达量;采用ELISA试剂盒检测小鼠血清中的肿瘤坏死因子(TNF-α)和白介素6(IL-6)水平,并采用RT-q PCR检测小鼠肝脏组织中的TNF-α和IL-6的基因表达量水平。第二部分:采用6~8周龄昆明种雄性小鼠,给予高糖高盐高脂饮食饲养,每周监测小鼠体重和腹围。造模成功后按体重随机分组,分为高脂饮食肥胖模型组(Model组)、香芩解热颗粒低剂量组(XQ4.5组,4.5g/kg)、香芩解热颗粒中剂量组(XQ13.5组,13.5g/kg)和香芩解热颗粒高剂量组(XQ22.5组,22.5g/kg)。正常小鼠分为Control组(生理盐水)和Control+XQ组(香芩解热颗粒,13.5g/kg),各组小鼠分别灌胃给予生理盐水和相应剂量的香芩解热颗粒,连续灌胃5周,监测各组小鼠每周体重、腹围和摄食量。给药结束后禁食不禁水12h,测量小鼠禁食体重、腹围、体长,并计算Lee指数;检测小鼠空腹血糖及糖耐量水平;准确称量小鼠内脏脂肪重、肝脏组织重和胸腺组织重,并计算内脏脂肪百分比、肝脏指数和胸腺指数;采用试剂盒检测小鼠血清和肝脏组织中的TG、TC、LDL-C和HDL-C水平;采用RT-q PCR检测小鼠肝脏组织中脂肪代谢酶ACC1、FAS、DGAT1和HTGL的基因表达量;采用Western blot法检测小鼠肝脏组织中AMPK、p AMPK和SREBP-1c的蛋白水平;采用RT-q PCR检测小鼠下丘脑中的神经肽Y(NPY)和原阿片黑素皮质素(POMC)的基因表达量水平;采用ELISA试剂盒检测小鼠血清中TNF-α和IL-6水平,并采用RT-q PCR检测小鼠肝脏组织中的TNF-α和IL-6的基因表达量。结果 第一部分:谷氨酸钠肥胖小鼠模型给予香芩解热颗粒治疗5周后,MSG肥胖小鼠体重、体重增长量、腹围、Lee指数均显著下降(P<0.01,P<0.05,P<0.01,P<0.01);内脏脂肪量和内脏脂肪百分比也都显著降低(P<0.01,P<0.01);血清TG、TC、LDL-C水平显著下降(P<0.01,P<0.01,P<0.01),肝脏TG水平显著降低(P<0.01),TC、LDL-C水平都没有明显变化,HDL-C水平有上升趋势但无统计学差异;肝脏组织中脂肪代谢相关酶ACC1、FAS和DGAT1的m RNA水平显著下降(P<0.01,P<0.01,P<0.01),HTGL m RNA水平显著升高(P<0.01);血清中IL-6水平和肝脏组织中IL-6 m RNA水平有下降趋势但无统计学差异(P>0.05),血清中TNF-α水平和肝脏TNF-αm RNA水平显著升高(P<0.01,P<0.05)。第二部分:高脂饮食肥胖小鼠模型给予香芩解热颗粒治疗5周后,HFD肥胖小鼠体重和体重增长量都显著降低(P<0.01,P<0.05),腹围和Lee指数也显著减小(P<0.05,P<0.05);脾脏指数显著下降(P<0.01),而胸腺指数和肝脏指数都没有明显变化;内脏脂肪量和内脏脂肪百分比都显著下降(P<0.01,P<0.01);空腹血糖和糖耐量水平也显著下降(P<0.05,P<0.01);血清TG、TC和LDL-C水平显著降低(P<0.01,P<0.01,P<0.05),HDL-C没有明显变化;肝脏TG和TC水平都显著下降(P<0.01,P<0.05),LDL-C水平显著升高(P<0.01),HDL-C有下降趋势但无统计学差异;脂肪代谢酶ACC1、FAS和DGAT1的基因表达量水平都显著降低(P<0.01,P<0.01,P<0.05),脂解酶HTGL的基因表达量显著升高(P<0.01);p AMPK蛋白水平和p AMPK/AMPK都显著升高(P<0.05,P<0.01),SREBP1c有下降趋势但无统计学差异(P>0.05);小鼠摄食量、食欲调节因子NPY、POMC的基因表达量水平以及NPY/POMC都显著降低(P<0.05,P<0.05,P<0.01,P<0.01);血清TNF-α水平显著升高(P<0.01),肝脏TNF-αm RNA水平有上升趋势但无统计学差异,血清IL-6水平有下降趋势但无统计学差异,肝脏IL-6 m RNA水平显著下降(P<0.01)。肝脏组织病理切片结果显示,HFD肥胖小鼠肝脏细胞发生严重脂肪变性,有大量球形脂滴,而给予香芩解热颗粒治疗后HFD肥胖小鼠的肝脏细胞脂肪变性明显改善,球形脂滴数量明显减少。结论 研究结果表明香芩解热颗粒对谷氨酸钠肥胖小鼠和高脂饮食肥胖小鼠的脂质代谢都具有较好的调节作用,并且能够有效降低肥胖小鼠的体脂量,抑制体重增长。同时香芩解热颗粒能够降低高脂饮食肥胖小鼠的摄食量,调控食欲调节因子水平,降低食欲,减少摄食量,还能够改善肥胖伴随的慢性低度炎症。在分子水平上,香芩解热颗粒能够激活肥胖小鼠的AMPK/SREBP1c/ACC1信号通路,调节脂肪代谢酶水平,从而调节脂质合成与代谢,减少体内脂肪堆积。
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