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我国夏季和早秋季节天气炎热,温度较高,严重影响了乌菜的产量和品质。为了进一步研究高温胁迫对乌菜的影响及其对高温的抵抗机理,本试验设置四个温度处理:20℃/12℃,27℃/18℃,34℃/24℃,41℃/30℃,处理时间三天,在 41℃/30℃高温处理后,将其置于20℃/12℃处理下恢复3天。对两种不同基因型乌菜的生长情况、光合参数、快速诱导荧光动力学曲线及JIP-测定参数、类囊体膜脂肪酸组分、类囊体膜蛋白复合物及差异蛋白点进行分析和对比。主要结果如下:1、高温胁迫会造成乌菜叶片失绿发黄、卷曲,甚至出现萎蔫症状。较高的温度下(34℃以上)会使株高、茎粗、干鲜重、叶宽、叶长等显著降低,同时叶片相对含水量和叶绿素含量也会减少,其降低和减少的幅度会随着胁迫温度的增高而增大。高温胁迫还会降低乌菜的净光合速率(PN)、气孔导度(Gs)和蒸腾速率(E),使胞间CO2浓度(Ci)升高,可见高温下乌菜光合速率的降低是由非气孔因素引起的。高温胁迫下,WS-1的生长各项指标及光合参数的变化幅度均明显小于WS-6,在恢复处理后WS-1的光合参数可基本恢复对照水平,WS-6却仍有较大差异。2、高温胁迫会改变快速诱导荧光动力学曲线的形状,WS-6在胁迫处理后OJIP曲线上出现了明显的K点,变为OKJIP曲线,而WS-1仍能维持典型的OJIP曲线。在JIP-测定所得的参数中,高温胁迫使两种不同基因型乌菜单位叶面积有活性的反应中心(RC/CSM)数目、单位叶面积吸收的光能(ABS/CSM)、捕获用于还原QA的能量(TR0/CSM)、用于电子传递的能量(ET0/CSM)和以吸收光能为基础的性能参数(PIABS)均显著下降,而用于热耗散的能量(DI0/CSM)则明显上升。高温处理后,WS-1对照相比变化的幅度远小于WS-6与对照相比的幅度,且各指标均明显高于WS-6。经过恢复处理后,WS-1的各项指标与对照相比基本恢复,而则很难恢复到对照水平,表明了较高温温度的处理对WS-6的光合机构损失较大。3、高温胁迫对乌菜类囊体膜脂肪酸组成种类并无影响,但其含量发生变化,不饱和脂肪酸(UFA)含量降低(以油酸、亚麻酸为主),饱和脂肪酸(SFA)含量升高(棕榈酸和硬脂酸),WS-1与WS-6相比变化幅度更大,表明其自我调节能力更强,增强了膜系统的稳定性,且恢复处理后WS-1基本达到对照水平。4、通过蓝绿温和胶电泳(BN-PAGE)成功分离得到7个膜蛋白复合物条带,两种不同基因型乌菜在组成种类上无明显差异。在二向SDS-PAGE电泳后,成功分离鉴定了15 个膜差异蛋白点,其中 ATP synthase subunit alpha OS,ATP synthase subunit beta,chloroplastic OS是ATP蛋白,主要是负责将ADP转化为ATP,提供能量;PhotosystemⅡ CP43 reaction center protein OS 和 Photosystem Ⅱ D2 protein OS 为组成光系统 II 电子传递链的一部分;Chlorophyll a-b binding protein 是 LHC 的光受体;Photosystem I P700 是光系统I的原初电子供体;BnaC03g29960D protein OS是一个未知蛋白。