背景:香菇在世界上已经应用推广多年,由于其一系列重要的特性,引起了人们广泛的关注。香菇具有多种胞外木质素降解酶,如木质素过氧化物酶(LiP,EC 1.11.1.14)、锰过氧化物酶(MnP,EC 1.11.1.13)和漆酶(EC 1.10.3.2)以及多功能过氧化物(VP,EC 1.11.1.16)。据报道,上述这些酶参与了环境难降解物质、内分泌干扰化学物质如五氯苯酚、多氯联苯和二噁英的降解。特别是,漆酶属于多酮氧化酶(MCOs),它拥有广泛的催化活性,包括多酚合成、降解以及木质素降解和黑色素形成等过程。目前,香菇中漆酶的确切含量尚不清楚,且其完整的性质和生物学功能也尚不清楚。根据大量报道,真菌漆酶涉及细胞壁的形成、致病性和果体着色等生物过程。近期研究发现,据说大多数担子菌基因组中,至少拥有10个基因参与并编码不同的漆酶。这些漆酶的功能并不局限于本身生物体的生理需要,最近报道也表明,由于这些多功能氧化酶具有很高的还原能力,它们还可用于生物技术领域,如食品加工、木浆工业和生物修复,从而证明其在经济效益和环境效益都能得到广泛应用。方法:首先,利用DNA测序技术对香菇菌株的遗传多样性进行鉴定和研究。采用内转录间隔序列和随机扩增多态性DNA两种DNA方法,从国家菌草工程技术研究中心收集到的单个菌株进行鉴定,并研究菌株种群的遗传多样性。其次,两种不同的基质配方被用来测试其有效性,以提供足够的营养,使菌株充分增长。第三,选育菌株(LC3031),从八株香菇菌株中提取漆酶,即:菌丝定植,在培养的30天时间内分三次取样;在蘑菇的褐变(转色)阶段,从基质中利用,培育出成熟的香菇子实体;在对照样品(木屑样品)和处理过的样品(菌草品种样品)。我们通过测定ABTS的氧化作用,通过测量420mn的吸光度,分析漆酶的活性。结果:从DNA的方法,如内转录间隔区域标记,样品真菌被证实是香菇。利用随机扩增型多态性DNA图谱研究了我国香菇种群的遗传变异。根据研究结果,观察到RAPD遗传距离与地理位置之间几乎没有或没有关系。在本研究的第二部分中,采用两种基质配方,研究了基质在配方使用前菌丝的运行速率对基体的有效性。研究表明,在使用的配方中,菌丝的生长速度没有统计学意义,香菇是一种可在一系列基质配方上培养的蘑菇。在研究的第三部分,在菌草处理的样品中观察到漆酶的整体活性较高,这暗示了对漆酶有刺激作用,但不能假设漆酶产物在不同的处理方式下是相同的,因为漆酶的类型可以受环境条件和基质成分的影响。最后,在对多铜氧化酶编码基因转录的分析中发现,漆酶基因活性与培养和发育早期菌丝生长成正比。相对于子实体来说,军四种的1cc1和1cc6是高度表达的。Lcc13和1cc12基因在菌丝发育的早期阶段最为活跃。此外,这些基因在菌丝发育过程中(连同木质素降解)和子实体的转录,进一步巩固了漆酶功能多样性的概念。结论:菌草品种对香菇发育阶段的漆酶活性有刺激作用。此外,多铜氧化酶编码基因显示了相对于菌丝生长的早期阶段的比例活性。这突出说明了漆酶活性在整个发育过程中的重要作用,这可能与形态发生和木质素降解有关。意义:本研究的重要性在于深入研究漆酶的分子表达及其相关的多铜氧化酶编码基因,以响应基质配方的变化,可替换已经有价值的来源例如木头(木屑)。这项研究的目的是利用环保可持续的菌草来研究基质对漆酶的生产产生的影响,并研究了几种多铜氧化酶编码基因在不同发育阶段的转录模式表达水平。因此,这将为基质对漆酶活性和相关基因的影响提供充分证据,这在生物技术领域和与发展蘑菇和木质素降解有关的主要生物学功能中有着极其重要的应用。