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目的： 探讨白三烯对PBMC和A549细胞IL-37表达的影响。 方法： 1.过敏患者及过敏豚鼠血清对PBMC和A549细胞IL-37表达影响 先后用收集的急性过敏性鼻炎患者、过敏性休克豚鼠血清分别与健康人PBMC及A549细胞共培养0.5、1、2、4、20 h，收集细胞，分别采用实时荧光定量PCR和Western blot法检测细胞中IL-37表达水平的变化。以未用过敏性患者血清和过敏豚鼠血清刺激的细胞为各自对照组。 2.肥大细胞活化产物对A549细胞IL-37表达影响 分离 SD大鼠腹腔肥大细胞（Mast cell, MC），用钙离子载体（Calcium ionophore, CI）活化MC，收集活化肥大细胞的上清液，用于孵育A549细胞，分别作用8、16、24 h后，收集细胞，采用Western blot法检测细胞中IL-37表达水平的变化。以未活化肥大细胞上清液孵育的细胞为阴性对照组。 3.白三烯D4（leukotrieneD4，LTD4）对PBMC和A549细胞IL-37表达影响 用1、10、100 nmol/L等不同浓度的白三烯D4刺激PBMC和A549细胞，另外，用1、10 nmol/L的白三烯D4分别与1、10μmol/L组胺（histamine，His）联合刺激PBMC和A549细胞，分别作用0.5、1、2、4、20 h后，收集细胞，分别采用实时荧光定量PCR和Western blot方法检测细胞中IL-37 mRNA和IL-37蛋白表达水平的变化。以未用白三烯D4刺激的细胞为对照组。 4.白三烯D4上调细胞IL-37表达的信号转导通路分析 分别用 JNK抑制剂（SP600125）、JAK抑制剂（AG490）、PI3K抑制剂（LY294002）、p38MAPK抑制剂（SB203580）、ERK抑制剂（U0126）预处理A549细胞30 min后，然后加入白三烯D4（10 nmol/L），作用6 h后收集细胞，采用实时荧光定量PCR检测IL-37 mRNA表达水平。以未用抑制剂预处理的细胞为实验对照组，未加药物的为空白对照组。 5. IL-37抑制白三烯诱导的炎症反应 用IL-37基因真核表达质粒转染A549细胞，转染成功后，用白三烯D4（10 nmol/L）及白三烯D4（10 nmol/L）联合组胺（10μmol/L）作用A549细胞，作用20 h后，收集细胞上清液，采用ELISA法检测细胞培养上清液中IL-6、IL-1β、TNF-α水平变化。以转染对照质粒pcDNA3.1的细胞为质粒对照组，以未加药刺激的细胞为阴性对照组。 随后，用IL-37的shRNA质粒转染A549细胞，转染成功后，分别用白三烯D4（10 nmol/L）及组胺（10μmol/L）分别刺激两复孔A549细胞。分别孵育8、20 h后，收集细胞及细胞上清液，分别采用实时荧光定量 PCR和 Western blot法检测细胞中IL-37表达水平，采用ELISA法检测上清液中IL-6、IL-1β、TNF-α水平变化。以转染对照质粒 pNC-1p2的细胞为质粒对照组，以未加药刺激的细胞为阴性对照组。 结果： 1.过敏患者及过敏豚鼠血清对PBMC和A549细胞IL-37表达影响 实时荧光定量PCR检测结果显示，PBMC经过敏患者血清分别作用0.5、1、2、4 h后，其IL-37 mRNA表达水平分别比对照组高2.81倍（p＜0.05）、6.55倍（p＜0.01）、9.74倍（p＜0.001）、2.07倍（p＞0.05）；A549细胞经过敏患者血清分别作用0.5、1、2、4 h后，其IL-37 mRNA表达水平分别比对照组高6.88倍（p＜0.01）、17.34倍（p＜0.001）、11.81倍（p＜0.001）、4.09倍（p＜0.01）。进一步用Western blot检测显示PBMC和A549细胞分别经过敏患者血清作用20 h后，其IL-37蛋白表达水平均较对照组显著增高。 实时荧光定量PCR结果显示，PBMC经过敏豚鼠分别血清作用0.5、1、2、4 h后，其IL-37 mRNA表达水平分别比对照组高4.52倍（p＜0.01）、12.91倍（p＜0.001）、21.51倍（p＜0.001）、3.63倍（p＜0.05）。A549细胞经过敏豚鼠血清分别作用0.5、1、2 h后，其IL-37 mRNA表达水平分别比对照组高9.81倍（p＜0.01）、19.05倍（p＜0.001）、6.76倍（p＜0.01）、2.73（p＜0.05）。进一步的Western blot法检测显示PBMC和A549细胞分别过敏豚鼠血清作用20 h后，其IL-37蛋白表达水平均较对照组显著增高。 2.肥大细胞活化产物对A549细胞IL-37表达影响 Western blot检测结果显示，活化的肥大细胞上清液孵育A549细胞8、16、24 h后，其IL-37蛋白表达水平较对照组显著增高，其表达水平随着肥大细胞活化产物浓度的升高而上升。 3.白三烯D4对 PBMC和A549细胞IL-37表达影响 实时荧光定量PCR检测结果显示，1、10、100 nmol/L等不同浓度的白三烯D4分别作用PBMC细胞0.5 h后，其IL-37 mRNA表达水平分别比对照组增高3.37倍（p＜0.01）、3.95倍（p＜0.01）、2.34倍（p＜0.05）；当作用至1 h时，其IL-37 mRNA的表达水平增高，分别约为对照组的9.81倍（p＜0.001）和18.04倍（p＜0.001）、1.40倍（p＞0.05）；当作用至2 h时，其IL-37 mRNA表达水平分别比对照组增高12.01倍（p＜0.001）、9.63倍（p＜0.001）、2.28倍（p＞0.05）；当作用细胞4 h时，其IL-37 mRNA的表达水平比对照组增高6.03倍（p＜0.01）、4.02倍（p＜0.05）、4.87倍（p＜0.01）。 另外，用1、10、100 nmol/L等不同浓度的白三烯D4分别作用A549细胞，当作用0.5 h时，其IL-37 mRNA表达水平分别较对照组增高2.15倍（p＜0.05）、1.74倍（p＜0.05）、1.15倍（p＞0.05）；当作用细胞至1 h后，其IL-37 mRNA的表达水平分别比对照组增高7.84倍（p＜0.001）、2.74倍（p＜0.05）和4.14倍（p＜0.01）；其中1 nmol/L的LTD4刺激细胞，其IL-37mRNA表达水平最高；作用2 h以后，其IL-37 mRNA的表达水平逐渐降低。 Western blot检测结果显示，1、10和100 nmol/L白三烯D4分别作用PBMC和A549细胞20 h后，IL-37表达水平随着LTD4浓度的升高而上升，其中100 nmol/L的白三烯D4作用细胞时，IL-37蛋白表达水平升高最为显著。 随后，用不同浓度的LTD4联合组胺分别刺激A549细胞，Western blot检测结果显示，随着白三烯D4与组胺作用浓度的升高，A549细胞IL-37蛋白表达水平上升，其中以LTD4（1 nmol/L）和LTD4（10 nmol/L）分别联合His（10μmol/L）刺激细胞时，其IL-37蛋白表达水平上升更明显。 4.白三烯D4上调细胞IL-37表达的信号转导通路分析 实时荧光定量PCR法检测结果显示，分别用JNK、ERK和 p38 MAPK等3个信号通路分子抑制剂预处理A549细胞后，与对照组相比较，其IL-37的表达水平分别下降了59.14%（p＜0.05）、87.61%（p＜0.001）、72.73%（p＜0.01）；而JAK和PI3K分子抑制剂预处理细胞后，其IL-37表达水平与对照组相比较稍有下降，但差异无统计学意义（P＞0.05）。 5. IL-37抑制白三烯诱导的炎症反应 ELISA结果显示，当白三烯D4（10 nmol/L）、白三烯D4（10 nmol/L）联合组胺（10μmol/L）分别刺激转染IL-37表达质粒的A549细胞后，其产生IL-1β的水平分别较质粒对照组降低了38.46%（P＜0.01）、39.42%（P＜0.01）、29.19%（P＜0.05）；其产生IL-6的表达水平分别较对照组降低了54.09%（P＜0.001）、43.03%（P＜0.01）、47.98%（P＜0.01）；其产生TNF-α的水平分别比对照组下降了60.21%（P＜0.001）、41.87%（P＜0.01）、68.30%（P＜0.001）。 进一步用RNA干扰技术沉默IL-37的表达，实时定量PCR结果显示，LTD4刺激后，两复孔转染 shIL-37A549细胞的 IL-37的表达分别较转染对照质粒的A549细胞降低了85.30%（P＜0.001）、80.47%（P＜0.001）；而His处理后，其IL-37表达则较对照质粒组分别降低了72.02%（P＜0.001）、84.13%（P＜0.001）。Western blot检测结果显示，转染shIL-37质粒的A549细胞，LTD4及His处理后，其 IL-37的蛋白表达均较转染对照质粒的对照组降低。ELISA结果显示，转染shIL-37的A549细胞经 LTD4、His刺激后，其 IL-1β水平分别比对照质粒组高2.04倍（P＜0.01）、1.88倍（P＜0.05）；IL-6水平分别比对照质粒组高3.24倍（P＜0.01）、3.14倍（P＜0.01），TNF-α水平分别比对照质粒组高2.61倍（P＜0.01）、2.32倍（P＜0.01）。 结论： 1.白三烯D4能上调PBMC和A549细胞IL-37表达。 2. JNK、ERK、p38MAPK等信号转导通路可能参与白三烯D4诱导A549细胞IL-37上调表达。 3. IL-37能明显减轻白三烯D4的致炎作用。