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化疗药物治疗肿瘤的主要机制之一是诱导细胞凋亡,其如何启动肿瘤细胞的凋亡的具体机制及其信号转导也是化学药物抗肿瘤治疗研究中的关键问题。阿霉素(Doxorubicin hydrochloride,DOX)是一种临床使用的抗肿瘤抗生素,星形孢菌素(Staurosporine,STS)是一种强有力的PKC抑制剂,两者均为常用的细胞凋亡诱导剂。尽管DOX或STS诱导凋亡作用已经比较明确,但在其诱导凋亡的过程中所涉及的具体机制及相关的癌基因、抑癌基因等信号分子的表达调控研究仍有待深入的研究。本论文主要研究DOX或STS对SMMC-7721细胞凋亡的诱导作用及可能的细胞凋亡途径,并进一步研究Bax、Bcl-2、p53、PTEN、FAK、p-FAK和ILK的mRNA和蛋白表达水平的变化,试图探讨DOX或STS诱导SMMC-7721细胞凋亡时的肿瘤相关分子的变化,以进一步了解DOX或STS在肿瘤治疗中的分子机制。在本论文中,以肝癌细胞SMMC-7721为研究对象,我们首先通过MTT方法对不同剂量的DOX或STS处理的细胞进行生长活性检测,发现DOX或STS处理均可明显抑制肝癌细胞的生长。接着,用光镜检测和DAPI染核荧光镜检方法对DOX或STS处理细胞进行观察,发现光镜下细胞和荧光镜下细胞核均出现了凋亡变化。再分别使用RT-PCR和Western blot方法研究DOX或STS处理时caspase凋亡途径关键酶caspase-3的mRNA和蛋白表达水平变化,发现caspase-3在转录水平上活化,蛋白水平上剪切激活。为研究caspase-3的激活的具体途径,我们又检测了DOX或STS处理后caspase-8和caspase-9的mRNA活化情况,发现在转录水平上,caspase-9上调,提示caspase-3的激活可能通过内源性途径。为进一步确证caspase-3的活化,我们通过Western方法检测DOX或STS诱导的caspase-3的活化后作用的主要底物PARP的蛋白表达水平,发现PARP在蛋白水平上剪切。因此,本论文首先证明了DOX或STS可以通过caspase-3途径诱导肝癌细胞凋亡,此caspase-3活化可能通过内源性途径。为研究DOX或STS诱导的凋亡对其相关分子的影响,我们对不同时间和剂量处理的肝癌细胞的Bax、Bcl-2、p53、PTEN、FAK、p-FAK(Tyr 397)、ILK分子的mRNA和(或)蛋白表达水平的变化进行了初步研究。结果发现DOX或STS诱导的凋亡可以诱导Bax转录水平增加、Bcl-2转录水平降低;诱导p53、PTEN的转录和PTEN蛋白水平升高,以使细胞进入凋亡过程,一旦细胞发生凋亡,p53、PTEN的转录和PTEN蛋白水平下降:诱导FAK转录和蛋白表达水平降低,诱导FAK磷酸化水平先升高,后降低;对ILK蛋白表达无影响。综上所述,DOX或STS可以通过caspase-3途径诱导肝癌细胞凋亡,凋亡途径可能均通过内源性途径。DOX或STS诱导的凋亡对Bax、Bcl-2、p53、PTEN、FAK表达均有明显影响,对ILK无影响。本文的结果对研究化疗药物的凋亡机制以及凋亡与肿瘤相关分子之间的联系有一定理论意义。