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邻苯二甲酸酯类(Phthalate Esters,PAEs)塑化剂是应用最为广泛的塑化剂产品,世界年产量高达上百万吨。21世纪初,PAEs凭借其优良的性能和低廉的价格成为塑化剂消费的主体,消费额高达塑化剂产品总量的85%以上。2011年台湾“塑化剂事件”引发了国内对PAEs使用安全性及健康问题的广泛关注。美国环保局(EPA)将包括邻苯二甲酸二丁酯(DBP)在内的6种PAEs列为“优先控制环境污染物”。我国于2008年施行的卫生标准(GB9685-2008)中规定从食品包装迁移到食品的DBP最大限量为0.3 mg/kg。PAEs是半挥发、热稳定、非极性且结构相似的一类化合物。使用毛细管柱的气相色谱法(GC)是常用的PAEs分离平台,而高灵敏度的质谱法(MS)则是常用的PAEs检测技术,因此国标采用GC-MS联用方法对PAEs进行检测。与其它报道过的方法一样,每种检测方法都存在各自的局限性:如设备价格昂贵、前处理复杂、检测限不符合要求等。应用免疫学检测方法可以有效解决上述问题,且具有特异灵敏、操作简便、成本低廉、省时高效等优势。本实验选择美国环保局(EPA)规定的6种优先控制级PAEs之一——DBP作为研究对象,用化学法合成了DBP-NH2半抗原,随后通过重氮化法将目标物DBP与载体蛋白BSA和OVA偶联,偶联比分别为1:30和1:42。以人工抗原DBP-BSA作为免疫原制备多克隆抗体,纯化后抗体效价达到2.56×105,蛋白浓度为18.72 mg/m L。然后建立了DBP的IC-ELISA检测方法,并优化了反应条件。DBP的IC-ELISA检测方法中,线性回归方程:y=22.315x-12.381(R2=0.9907),线性检测范围:10 ng/m L~38.7μg/m L,最低检测限:6.44ng/m L。与BBP的交叉反应率为41.7%,与其它9种PAEs的交叉反应率均小于1%。该方法也可以用于单组份BBP的检测,初步建立线性回归方程:y=17.815x-6.6003(R2=0.9859),线性检测范围:31.12 ng/m L~72.63μg/m L。模拟样本检测实验中,水和饮料样品的回收率为86.8%~118.7%;食用油样品的回收率为91.2%~126.7%。用该方法对实际样本进行检测(样本量=100),水、饮料、食用油样本中DBP的检出率分别为40%、94%、100%,平均检出量分别为17.16 ng/m L、26.48 ng/m L、86.14 ng/m L。样本中DBP的残留量均未超标。