过表达TRIM11对结直肠癌DLD-1细胞5-FU敏感性的影响

来源 :南昌大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ctrl111shift
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:  初步探究TRIM11在结直肠癌组织或细胞内表达情况,及其对5-FU敏感性的影响。  方法:  1.收集结直肠癌患者术后新鲜癌组织及其对应癌旁正常组织标本,选用qRT-PCR(荧光定量PCR)检测TRIM11mRNA的表达量。  2.分别培养11种结直肠癌细胞株,选用qRT-PCR检测各肿瘤细胞内TRIM11mRNA的表达量。  3.构建 pSin-TRIM11质粒载体,利用慢病毒转导技术转染结直肠癌细胞DLD-1,构建过表达 TRIM11细胞系(即DLD-1-TRIM11组),转染pSin/neo为空白质粒对照组(即DLD-1-vector组),最后通过 western blot鉴定DLD-1-TRIM11组TRIM11蛋白被成功过表达。  4. DLD-1-TRIM11组和DLD-1-vector组分别加入不同浓度5-FU处理24h后,行CCK-8检测细胞活力。  5.150ug/ml的5-FU分别作用两组细胞24h后,行流式细胞术检测细胞凋亡率。  6.利用生物信息学软件TargetScan对TRIM11调控的miRNAs进行预测。  结果:  1.组织qRT-PCR显示:7例组织标本中,有5例TRIM11mRNA表达量在结直肠癌组织中显著低于其对应癌旁正常组织(P<0.05)。  2.细胞qRT-PCR显示:在11种结直肠癌细胞株中,TRIM11mRNA表达量各不相同,其中HT29表达量最高,而DLD-1表达量最低。  3.与DLD-1-vector组比较,TRIM11蛋白水平在DLD-1-TRIM11组细胞中显著性提高(P<0.05)。  4.CCK-8结果显示:DLD-1-TRIM11组细胞活力显著低于 DLD-1-vector组(P<0.05),DLD-1-TRIM11组半数抑制率(IC50=13.94ug/ml)明显低于DLD-1-vector组(IC50=110.24 ug/ml)。  5.流式细胞术结果显示:DLD-1-TRIM11组细胞凋亡率明显高于DLD-1-vector组(P<0.05)。  6.TargetScan软件预测:miR-9也许能靶向调控TRIM11。  结论:  1.利用慢病毒转导技术转染结直肠癌细胞DLD-1,pSin-TRIM11质粒载体能显著性提高TRIM11的蛋白表达。  2.在结直肠癌细胞 DLD-1中过表达 TRIM11时,可能提高 DLD-1细胞对5-FU的敏感性。
其他文献
结合果树管理技术的应用,研究将紧密结合果树管理的现实状况提出相关问题,并且会结合问题寻找解决问题的思路和办法,为后续的果树管理工作开展以及技术应用提供有效的保障和
草囤生产豆芽,适用于我国北方地区进行小批量生产,其特点如下。①方法简单:单人每次可生产10~15囤。②时间短:黄豆、黑豆生豆芽只需70个小时即可出囤食用或销售。③不受季节气
在高中英语口语教学过程当中,教师可以有意识地设计一些丰富的英语口语讨论活动,从而能够使每一个学生都积极地参与到小组的讨论过程当中.另外,Chinese traditional culture
期刊
近几年,随着大数据、区块链、AI技术的发展,人工智能得到了迅速的发展,在教育领域的实际应用逐渐展现出来.使得教师从劳动中解放出来;学生由被动学习变为主动学习;学生的学习
随着社会的发展,岩土工程勘察工作也取得了很大的进步,作为一项基础性的工程,岩土工程技术水平的高低决定了工程的设计和施工情况,意义重大.笔者从基础地质与岩土工程勘察概
这是一盆表现层岩地貌的特大型水旱盆景。作者将山体斜亘于盆中,中间断开一洞,透过岩洞望去,远山浮现于烟波浩淼的水面;左侧滩矾隐现,以示水域复杂;右侧小岛上安放一户人家,
莴苣是早春上市较早的蔬菜,近年来种植面积不断扩大。但随着种植年限增加,霜霉病等病害发生也逐年加重。莴苣霜霉病主要危害叶片。发病初期植株下部叶片产生淡黄色近圆形或多
目的:  通过测量大样本正常新生儿眼轴长度(axial length,AL),探究正常新生儿AL范围、特点及与性别、分娩方式、胎龄以及出生体重的关系。  方法:  采用横断面研究。共选
针对对外汉语教学中汉字教学难的问题,在现有汉字教学和部件、汉字使用频率的研究基础上,从汉字的层级和结构单位入手,可以进一步探索面向非母语人群的汉字教学方法和路径.通
知识产权原属纯法律的范畴.是指公民、法人或其他组织对其在科学技术和文学艺术等领域内.主要基于脑力劳动创造完成的智力成果所依法享有的专有权利.根据我国第五章第三节的