杀虫剂对中华蜜蜂解毒酶的影响

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吡虫啉和氟胺氰菊酯是农业生产中常用农药,亚致死剂量的农药影响意大利蜜蜂(意蜂)的识别行为、采集行为和生长发育。中华蜜蜂(中蜂)比意大利蜜蜂对农药更加敏感,但有关中蜂的毒理学特性研究较少,本论文研究了不同时间和剂量的吡虫啉和氟胺氰菊酯作用下,中蜂解毒酶的活性变化,以及亚致死剂量的吡虫啉对中蜂转录组表达的影响。在实验室条件下,采用饲喂法和药膜法,测定吡虫啉对中蜂的LC5为3.044mg/L和0.683 mg/L,氟胺氰菊酯对中蜂的LC50分别为177.314 mg/L和7.024 mg/L。LC5浓度的吡虫啉处理,不同作用方式之间差别较大,中蜂体内解毒酶活性都呈现波动性变化。饲喂处理可诱导细胞色素P450(P450)和羧酸酯酶(CarE)活性升高,在4 h达到最高值,分别为对照的1.44和1.27倍;谷胱甘肽硫转移酶(GSTs)在12 h达到最大值,为对照的1.21倍。药膜法处理后,P450和GSTs均被抑制,在4h和12h酶活性最低,达到对照的0.59倍;CarE激活明显,在16 h最大,为对照的1.4倍。饲喂高剂量的吡虫啉抑制解毒酶活性,高浓度的吡虫啉药膜激活解毒酶活性。LC5浓度氟胺氰菊酯处理,饲喂法作用下,P450活性显著降低,然后逐渐提高,在16 h最高,为对照的1.28倍;CarE活性随着时间延长逐渐降低,在24 h最低,为对照的0.78倍;GSTs活性变化幅度不大,始终高于对照。药膜法处理后解毒酶活性受到抑制,P450活性在12 h时最低,为对照的0.5倍;CarE和GSTs酶活性在20 h最低,为对照的0.7倍。高剂量的氟胺氰菊酯药膜激活三大解毒酶活性,饲喂高剂量的氟胺氰菊酯对解毒酶的影响不大。作为蜜蜂神经系统中的一个重要酶,乙酰胆碱酯酶(AChE)对神经系统信息传递至关重要。杀虫剂可以改变AChE的活性。LC5浓度的吡虫啉和氟胺氰菊酯处理中蜂后,在24 h内AChE活性呈现下降-上升的趋势。饲喂低剂量的吡虫啉激活AChE活性,LC20以上的高剂量不改变AChE活性,而高剂量的氟胺氰菊酯抑制AChE活性。药膜法作用后,低剂量吡虫啉对AChE没有影响,LC30浓度时酶活性显著提高,但是LC10低浓度的氟胺氰菊酯激活AChE活性,随着剂量变大,活性逐渐降低。相同浓度的杀虫剂,使用不同的作用方式,对中蜂三大解毒酶和AChE的影响不同。药膜法的毒性高于饲喂法,蜜蜂取食含有杀虫剂的糖水后,经过中肠内多种解毒酶的解毒代谢作用,降低了杀虫剂的毒性。饲喂LC5浓度的吡虫啉,可以明显改变中蜂转录组的表达,随着时间的延长,转录组的表达受到的影响逐渐变大。这些表达量发生改变的基因主要富集于氨基酸代谢、脂类代谢、核酸代谢、碳水化合物代谢、能量代谢、辅助因子和维生素代谢、多糖合成与代谢系统、免疫系统、外源性化合物代谢系统等,这些系统多与增强蜜蜂代谢和抗性能力有关。本文从酶活性和转录组表达水平全面分析了农药对中蜂的影响,为以后深入研究中蜂的农药代谢机理,阐述杀虫剂对中蜂的影响奠定基础。
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