论文部分内容阅读
本试验通过在基础日粮中添加0.10%牛膝多糖(ABPS),腹膜注射大肠杆菌脂多糖(LPS)建立应激模型,研究牛膝多糖对断奶仔猪肠道内部微生物细菌的多样性影响,探讨牛膝多糖能否缓解应激下断奶仔猪肠道损伤,促进肠道微生物益生菌群稳定和对营养物质的吸收。试验选用48头健康的28日龄体重相近的断奶仔猪(杜洛克×长白×大白,),按随机原则分成4个处理(正常对照组、脂多糖对照组和2个试验组,即空白组Ⅰ,对照组Ⅱ,试验组Ⅲ,实验组Ⅳ),每个处理12个重复,每个重复1头猪。预饲期6d,正式试验期18d。试验第1-15d,不进行脂多糖刺激,空白组Ⅰ和对照组Ⅱ饲喂基础日粮,试验组Ⅲ饲和试验组Ⅳ饲喂基础日粮添加0.10%牛膝多糖,自由饮水和采食。试验第16d,对照组Ⅱ和试验组Ⅲ断奶仔猪腹膜注射80μg/kg·BW脂多糖,空白组Ⅰ和试验组Ⅳ注射相应剂量的灭菌生理盐水,各处理所饲喂的日粮与前期(1-15d)一致。实验分析内容:试验第16d,注射脂多糖和生理盐水,1h后,按1ml/kg·BW对所有试验仔猪口服10%的D-木糖溶液,1h后前腔静脉采血。采用间苯三酚显色法测定D-木糖含量。注射LPS3h、24h后,取回肠、盲肠、结肠内容物。对肠道内容物细菌16S rDNA可变区经过PCR扩增,并将所得扩增产物经变形梯度电泳后再进行相似性分析。注射LPS3h、24h后,采取回肠、盲肠、结肠内容物。对肠道内容物中的大肠杆菌、乳酸杆菌和肠球菌的特有序列进行荧光定量PCR分析。试验分析结果:(1)结果表明,脂多糖刺激可显著降低肠道吸收D-木糖能力(P<0.05);正常条件和脂多糖刺激下,添加0.10%牛膝多糖极显著提高了血浆中D-木糖含量(P<0.01)。即,饲料中添加0.1%牛膝多糖既可提高仔猪肠道对营养物质的吸收能力,也可缓解了脂多糖刺激所导致的肠道吸收功能下降。在断奶仔猪日粮中添加牛膝多糖,具有提高仔猪肠道吸收能力和缓解脂多糖刺激所导致的肠道吸收功能下降的作用,促进动物的生产效率提高。(2)注射LPS3h后的各组仔猪相应肠道内容物电泳谱带差异不明显;注射LPS24h后的仔猪肠道内容物变形梯度电泳谱带与空白组Ⅰ的仔猪间图谱相似,而对照组Ⅱ仔猪与空白组Ⅰ变形梯度电泳图谱间差异,对照组Ⅱ的仔猪变形梯度电泳图谱带逐渐增多,变得复杂和多样,与试验组Ⅲ个体间变形梯度电泳图谱差异逐渐增大。(3)正常生理条件下,添加牛膝多糖对断奶仔猪各肠段乳酸菌数、大肠杆菌数、肠球菌数有显著影响;免疫应激条件下,添加牛膝多糖可以显著影响各肠道3种细菌数,使其维持在正常生理条件水平。因此,牛膝多糖对正常条件和应激条件下的断奶仔猪部分肠道内微生物多样性及其变化的影响明显,有助于维持健康和增强动物抗应激能力。