miR-133a-3p通过靶向RFC3增强顺铂对非小细胞肺癌的化学敏感性

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化学耐药性已经成为影响非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)治疗效果的主要障碍。不断有新出现的证据表明,微小RNA(micro RNA,miRNA)与NSCLC治疗过程中出现的化学耐药性密切相关。恶性肿瘤之所以发展快、致死率高,与它的以下特征密切相关:无限的复制增殖能力、持续的血管生成能力、避免细胞死亡(凋亡)、对组织的浸润与转移能力、持续自主生长信号的产生、对生长抑制信号的不敏感、对能量的高产出、免疫逃逸、基因组不稳定等。近年关于miRNA的研究发现,miRNA通过对靶基因的负性调控作用与肿瘤密切相关。肿瘤细胞的多种生物学过程,如细胞增殖,凋亡发生,生成新生血管等都有miRNA的参与,全程影响了肿瘤发生、发展的过程。作为常见的与肿瘤相关的miRNA,miR-133a-3p在许多癌症中低表达,并起着抑制肿瘤的作用,可预防乳腺癌,胃癌,胰腺癌等癌症的发展。关于miR-133a与肺癌的关系,已有研究表明,miR-133a过表达显著增加了A549/DDP细胞对于DDP的敏感性。我们的研究旨在探讨miR-133a-3p对于顺铂(cisplatin,DDP)治疗NSCLC时耐药性产生的潜在作用,并对可能的作用机制进行研究。我们的实验研究,采用了实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,q RT-PCR)技术,检测了miR-133a-3p在两组耐药细胞株,A549/DDP、SPC-1/DPP中的表达,发现miRNA的表达水平有明显的下降。此外,通过CCK-8增殖实验,流式细胞技术和蛋白质印迹分析(Western Blot Analysis,WB)发现,miR-133a-3p的上调显著抑制细胞增殖,促进DDP耐药NSCLC细胞的细胞凋亡并诱导细胞周期停滞,并且能够增强耐药NSCLC细胞对DDP的敏感性。针对miR-133a-3p作用机制,我们的研究证明,复制因子C(Replication factor C,RFC)3是miR-133a-3p的特定下游,RFC3的表达负向影响了miR-133a-3p的表达,针对二者之间的关系,深入研究发现,RFC3水平的升高部分干扰了miR-133a-3p模拟物在细胞增殖,细胞凋亡,细胞周期停滞过程中的作用,以及影响了耐药NSCLC细胞对DDP的敏感性。这项研究为miR-133a-3p可以作为NSCLC对DDP治疗耐药的新型诊断靶标提供了实验基础。
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