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杂种优势是生物界普遍存在的一种自然现象.自该世纪30年代人们在生产上应用杂交玉米取得高产后,杂种优势便开始在农作物生产上大规模应用.目前,水稻、玉米、油菜等主要农作物在生产上都已广泛实现杂种优势的利用.小麦作为世界第二大作物,杂种优势利用目前仍处于研究和开发阶段,其中一个重要原因之一,就是其繁殖系数低,增加了种子生产成本,如何提高制种产量则是杂种小麦走向生产的关键.显、隐性多子房小麦的发现,为利用小麦多子房的特异性大大提高制种产量提供了一个新的契机.随着近几年生物技术的发展,从分子水平上揭示多子房基因,然后快速定向地转移到"三系"或组配强优势组合优势群亲本中,为提高杂种小麦的繁殖系数,增加制种产量提供了可能.该研究正是基于这一点,利用BSA法,以该课题组多年种植的遗传相当稳定的显性多子房小麦多Ⅱ与普通小麦西农1376进行杂交,从F<,2>分离世代,建立多子房性状基因池和单子房基因池,采用RAPD-PCR方法,以440个随机引物筛选多子房近等基因系的混合群体及其双亲,获得下述重要结果:1.建立了多子房小麦RAPD扩增反应的最佳反应体系:25 μ L反应体系中,模板DNA 50ng,10×PCR缓冲液2.5 μ l,dNTPs200μ M,Taq酶0.33 μ l(3u/μ l),Mg<++>浓度为2.0mmol/L,ddH20 12.17 μl,随机引物10ng.该体系可作为多子房小麦RAPD反应的参考体系.2.运用BSA法建立单子房、多子房的近等基因池,同时用RAPD的440个随机引物对单、多子房亲本及其近等基因池进行引物筛选,共筛选出了38个引物存在多态性,其中10个引物(s3,s12,s15,s40,s71,s118,s221,s236,s237,s295)在双亲及其混合群体表现出特异性,表现为多子房亲本及其混合群体有带,单子房亲本及其混合群体无带;6个引物(s121,s232,s326,s364,s386,s388)扩增产物表现出的特异性相反,单子房有带,多子房无带.3.经过实验重复和群体单株验证,引物S236在多子房亲本、混合群体及其群体单株中都表现出稳定的多态性,因此可以作为多子房显性基因的分子标记.4.在应用RAPD-PCR进行目的基因的分子标记时,如果扩增出特异带时,应尽量采用相同条件去重复实验,尤其是Taq酶和Mg<++>应采用同一生产批号的产品.5.在应用BSA法建立相对性状基因的近等基因池时,所选混合群体的单株数不宜过多,若基因池所含植株数较少,由于取样的随机误差导致两池的DNA出现差异的机会增加,易出现假阳性;若基因池所含植株数较多,则属于同一池的植株在目的基因邻近的染色体因交换增多而变小,从而难以检测出多态性位点.一般取10-20株为宜.