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通过对3个杂种系的17个品种及1个野生种共19个杂交组合的研究,深入探讨了授粉时期、割柱、父母本花柱长度等因素对百合受精前障碍的影响和克服方法,获得了260个杂种胚,通过胚培养获得1800株杂种苗。利用核型分析及SRAP分子标记的方法对两个杂交后代进行了真实性鉴定。试验结果如下:
(1)通过不同花柱切割比例处理的百合7个近缘组合杂交后,结实情况差异不大,且成胚率均小于对照。开花当天授粉的成胚率普遍比蕾期授粉和开花后一天授粉的要高。
(2)切割花柱授粉法促进‘Sorbonne’的自交结实,获得30个自交胚,与对照比差异极显著。
(3)11个近缘杂交组合中,切割花柱授粉法使本来亲和的6个近缘杂交组合所形成的杂种胚数从30个以上减少至10个以下,有的组合甚至没有得到杂种胚。
(4)正反交的4个组合,以花柱较长的亲本为母本时成胚数较多;母本相同的2个近缘杂交组合,父本花柱较短的组合成胚数较多。
(5)(‘Brunello’בYellow Jiant’)FI和(‘Prato’×Lilium.pumilum)F<,1>两个杂交后代均为三倍体,由不同倍性的亲本杂交而来,且随体丰富。
(6)筛选出4对多态性高的SRAP引物对试材进行扩增。杂交后代除了含有父母本的特征带,还具有父母本没有的谱带,且它们与母本间的遗传距离均小于其与父本间的遗传距离。
本研究的结果表明:
1.对于大部分有一定亲和性的近缘杂交组合,采用柱头授粉方法即可,而无需切割柱头。授粉时期选择开花当天或者开花后一天较适宜。切割花柱授粉法能克服‘Sorbonne’的自交不亲和性,但对本试验的近缘杂交组合没有促进作用。对于部分近缘杂交组合,母本花柱比父本花柱长,并不阻碍杂交结实。
2.核型分析和分子标记的结果一致,均证实了两个杂交后代的真实性,且两个杂交后代在遗传上均偏向母本。