茶多酚纳米乳的制备及其吸收动力学研究

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茶多酚是绿茶中的主要活性物质,但是它的化学稳定性较差并且口服生物利用度很低,从而限制其在食品药品等领域的应用。本文研究目的是为了探究纳米乳剂(o/w)包裹茶多酚后对茶多酚的理化稳定性、体外消化及大鼠体内代谢的生物利用度的影响。本文通过用玉米油包裹茶多酚,分别添加吐温80和油茶总皂苷作为乳化剂,经过高压均质机均质后分别制得水包油型(o/w)茶多酚纳米乳(Nano-A)、茶多酚皂苷纳米乳(Nano-B)和皂苷纳米乳(Nano-C)。在4、25和40℃下分别储存Nano-A、Nano-B、Nano-C和茶多酚水溶液,每隔5天取样分析乳剂粒径、电位、p H及多酚变化。通过模拟体外消化,分析检测主要儿茶素的消化生物利用度和油茶总皂苷的变化来预测纳米乳在大鼠体内的代谢情况。根据已有儿茶素在大鼠体内的代谢研究,本文对SD大鼠进行灌胃Nano-A和茶多酚水溶液实验,测定大鼠血浆中儿茶素的含量。结果表明,纳米乳可以通过体外和体内模型改善茶多酚的生物利用度。实验主要研究结果如下:(1)制备的三种不同纳米乳Nano-A、Nano-B和Nano-C,均采用高压均质的方法(1000bar,循环5次),得到的乳剂粒径分别为99.42nm、155.58nm和148.54nm,均达到纳米级,ZETA电位绝对值在30~60m V之间,多分散系数较低,乳剂相对比较稳定。(2)利用玉米油包裹茶多酚制备出的纳米乳Nano-A与Nano-B包封率分别为17.4%和15.69%,包封率虽不高,但是对多酚中的儿茶素有一定的保护作用,并且制备成本较低,操作简单易于制备。(3)Nano-A与Nano-B的储存实验表明,在25℃下,Nano-A在25天左右发生明显变质,而Nano-B在100天左右发生变质,因此使用天然的油茶总皂苷作为乳化剂比吐温80能更好的延长乳剂的储存时间。在4℃储存Nano-A和Nano-B,Nano-A粒径和电位绝对值分别在100nm和30m V左右,Nano-B粒径和电位绝对值分别在170nm和60m V左右,因此随着储存时间的延长,乳剂没有发生明显的颗粒聚集且仍保持较好的稳定性。(4)在4、25和40℃下分别储存Nano-A和Nano-B时,4℃条件下储存乳剂的稳定性最好,且纳米乳对多酚有较好的保护作用。(5)模拟体外消化三个阶段:在口腔消化10min后,Nano-A中EGC生物利用度为77.29%,EC和EGCG生物利用度分别为90.58%和87.36%,GC、GCG和ECG生物利用度基本保持不变;Nano-B中主要儿茶素生物利用度均在90%以上,部分儿茶素出现降解可能是溶液的弱酸性环境导致的。胃消化2h,除GC完全代谢外,其余儿茶素均没有明显降解,可能胃酸环境有利于儿茶素稳定,纳米乳剂对儿茶素也有保护作用。小肠消化2h后,儿茶素均有明显降解,可能是小肠消化为中性或微碱性条件易于儿茶素的自动氧化分解,并且Nano-A对EGCG、GCG和ECG的保护作用较Nano-B更好些。(6)根据药代动力学参数结果显示,纳米乳可以有效的改善茶多酚中两种主要儿茶素EGCG和EGC的口服生物利用度。Nano-A中EGCG与EGC在大鼠体内的最大浓度(Cmax)分别为166.71μg L-1和59.91μg L-1,药时曲线下面积(AUC)分别为17.15mg L-1 min和6.11mg L-1 min,而茶多酚水溶液EGCG与EGC的Cmax分别为258.84μg L-1和26.58μg L-1,AUC分别为13.32mg L-1 min和4.76mg L-1 min,Nano-A与茶多酚水溶液相比,EGCG与EGC在大鼠体内的Cmax明显降低,而AUC有所增加,纳米乳对包裹着的儿茶素有缓释作用。
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