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肠道病毒71型(Enterovirus71, EV71)是手足口病(hand, foot and mouth disease, HFMD)的主要病原体,病毒感染多发于婴幼儿,表现为手足口病、无菌性脑膜炎、急性驰缓性麻痹、脑干脑炎和其他一些严重的神经系统疾病,包括肺水肿和心肺功能障碍。近年来,我国EV71感染出现流行趋势,2008年国家已将手足口病纳入丙类传染病管理,预防EV71感染、降低发病率成为重要的公共卫生问题。疫苗接种是预防控制最有效的方法,中国医学科学院医学生物学研究所筛选出EV71FY-23K-B株作为毒种研制成人用灭活疫苗。由于EV71存在不同的亚型,不同株、不同亚型间是否有交叉保护作用关系到疫苗的预防效果。为充分了解我所疫苗对于其他不同EV71毒株的交叉保护性,本研究应用FY-23K-B株免疫血清对收集的K9、S1、R20-9J-3、S19、合49、BrCr等20个EV71不同毒株,同时对同属的脊髓灰质炎病毒(polio Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ)、柯萨奇A组16型(CoxA16)、埃可病毒2/6型(ECHO2/6)等8株非EV71肠道病毒株进行中和试验。结果表明FY-23K-B株制备的疫苗对于A型株和不同的C4亚型株表现出广谱抗原性,其中4U(中和抗体)的特异性免疫血清已具有显著的中和效应,而2U血清中和效力相对较低,只能中和约35%的毒株；没有发现该株血清对其它8个非EV71的肠道病毒株的交叉保护作用。开发联合疫苗是疫苗发展的方向,为此我们就EV71与甲型肝炎病毒(Hepatitis A virus,HAV)灭活疫苗联合免疫的可行性进行了研究。我们将EV71(EU/ml)/HAV (EU/ml)进行不同的组合成为640/320、640/160、640/80、160/1280、160/640、320/640、640/640共7个联苗组,免疫ICR小鼠,并与相同剂量的单价疫苗组进行对比。初免后28天和加强后7天检测机体的特异性体液免疫和细胞免疫应答水平,结果发现初免后28天各组小鼠100%产生了保护性HAV抗体,160/640(EV71/HAV)组最高(4676.6mIU/ml),最低组为HAV80EU/ml单价组(131.5mIU/ml),加强后抗体平均增长12.2倍,其中160/640(EV71/HAV)组高达28101.8mIU/ml,但该组与320/640、640/640组间差异无统计学意义(P>0.05)。初免后血清中EV71抗体阳转率即达到100%,各组平均GMT值为14.5,并表现出剂量效应,其中640/80(EV71/HAV)组抗体水平最高,但其与640/640、640/320、640/160组间差别无统计学意义(P>0.05)。流式细胞术检测发现初免后各组小鼠脾脏中CD8+细胞比例高于CD4+细胞(P<0.001),加强后则相反(P<0.001),而HAV全病毒和EV71多肽刺激脾细胞产生的阳性反应弱,加强后脾细胞分泌的IL-4高于IFN-γ(P<0.05)。说明一定剂量的HAV和EV71联合免疫可诱导机体产生良好的体液免疫应答,但细胞免疫应答较弱,就体液免疫应答而言,我们认为640/640(EV71/HAV)组的剂量配比是比较理想的；未发现两种抗原间存在相互干扰或协同作用。