D-对羟基苯甘氨酸是制备β-内酰胺类抗生素如羟氨苄青霉素、头孢菌素的重要中间体。最常见制备的方法有3种，其中最经济的方法应属生物酶法。恶臭假单胞菌能同时产生两种酶：海因酶和D-氨甲酰基水解酶，该菌产生的两种酶能一步到位将对羟基苯海因催化生成D-对羟基苯甘氨酸。而酶法生产D-对羟基苯甘氨酸产业化的关键是要有一个产酶活高的菌株，由于野生菌株一般为低产菌株，因此，如果能通过诱变成功筛选到假单胞菌的高产菌株并能顺利进行扩大培养和遗传传代，则在实际工业化生产D-对羟基苯甘氨酸中是十分有价值的。本文主要研究恶臭假单孢杆菌诱变选育，得到的改良菌种能更好地应用于生产。研究结果如下： 对原始出发恶臭假单胞菌进行了水平验证。通过比浊法检测到该菌的生长曲线，找出最佳诱变期为菌种活化达到24h左右，同时用PDAB法分析到该菌株的酶活与生长曲线的规律，在对数生长后期酶活较高；用HPLC法检测出原始菌株的初始酶活为0.107μ／mL。 运用UV、MW、US以及三种因子联合进行菌株诱变，并且结合底物类似物进行理化定向筛选。最后选育出了数株海因酶和D-氨甲酰基水解酶的高产菌株。其中诱变株的总酶活最高，达到了0.440μ／mL，较原始出发菌株提高了近311.21％。 在原发酵培养基和发酵条件的基础上，对培养基和发酵条件进行了优化。经过实验得出诱变株在新的培养条件下酶活有进一步的提高。实验得出的最佳培养基配方为玉米浆3.0％，葡萄糖2.5％，诱导剂（10％甲硫乙基海因）3.5％，NaCl0.3％；诱变株在该配方条件下生长良好，酶活较优化前提高了11.8％；最佳的发酵条件为：接种量10％，装量40mL，发酵周期26h，初始pH7.4。最终得到的发酵结果比较理想，经过数次传代酶活并没有下降现象。