湖南大戟科野桐属遗传多样性及其亲缘关系研究

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本研究结合ISSR和传统的形态分类学对湖南大戟科野桐属的12个种(南平野桐,毛桐,东南野桐,崖豆藤野桐,杠香藤,粗糠柴,白背叶,红叶野桐,小果野桐,野桐,野梧桐,桃源野桐),以及假奓包叶(Discocleidion rufescens)和山麻杆(Alchornea hunanensis)的亲缘关系进行了分析。 本研究采用了CTAB法2提取各物种的植物基因组DNA,并对ISSR反应程序中的一些重要参数进行摸索和优化,建立了稳定的、适用于湖南大戟科野桐属遗传多样性和遗传分化研究的ISSR-PCR反应体系。经过优化后的反应体系为:10μlPCR体系中,0.5U TaqDNA聚合酶,0.2μmol/L引物,0.2mmol/L dNTPs,1.5mmol/LMgCl2,10ng模板DNA。最佳扩增条件为:1)预变性:94℃,1.5分钟;2)变性:94℃,45秒;3)退火:52℃-55℃,45秒;4)延伸:72℃,1.5分钟;共35个循环后,最后延伸7分钟。 本研究用POPGENE软件对14个种进行了多态性比较和聚类分析,研究结果表明:1)野桐属具有相对较高的遗传多样性水平,这与其广泛的地理分布相符;2)作为参照的假奓包叶(Discocleidion rufescens)和山麻杆(Alchornea hunanensis)与野桐属(Mallotus)的12个种在遗传距离相差甚远,这与经典分类学的结果吻合;3)本研究聚类结果将崖豆藤野桐、杠香藤、粗糠柴聚在同一大类上是合理的;4)野桐与野梧桐不应合二为一,还是作为独立的种为好;5)桃源野桐是一新种,并非红叶野桐居群内部自然杂交产生的,且它与小果野桐的亲缘关系最近。此外,桃源野桐是否可另立一新组——桃源野桐组,还须通过实验进一步验证。
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