动蛋白Kinesin-13A和类锚蛋白AtANK1在植物细胞中的分布及功能

来源 :中国农业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:mnjhkiuu
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本文通过免疫金标结合电子显微镜观察,发现AtKinesin-13A定位于拟南芥根冠细胞高尔基体附近的囊泡膜上。利用相应基因的T-DNA插入突变体,发现AtKinesin-13A缺失突变后,拟南芥根冠分泌活动较旺盛细胞中高尔基体附近的囊泡数目明显减少,而且其直径也变小,细胞出现液泡化。通过干旱处理,发现突变体更早的萎蔫死亡,说明AtKinesin-13A缺失突变体较野生型对干旱更加敏感。根据以上结果,本文认为AtKinesin-13A可能参与了高尔基体囊泡形成和维持的调控。 通过简并RT-PCR和用AtKinesin-13A的抗体免疫印迹发现烟草中也存在AtKinesin-13A类似蛋白即NtKinesin-13A,其分子量约为120kDa,且其表达无组织特异性,结合AtKinesin-13类似基因在棉花、水稻等植物的存在,可以推测Kinesin-13A在植物细胞中普遍存在。免疫荧光和免疫金标发现NtKinesin-13A也定位于高尔基体附近的囊泡膜上。AtKinesin-13A与NtKinesin-13A在细胞中定位的相同,预示两者在相应植物中可能有相同的生物学功能。 通过RT-PCR从拟南芥中克隆到一个类锚蛋白基因AtANK1,通过免疫印迹发现其编码的蛋白分子量约为70kDa。AtANK1是拟南芥中与人类细胞高尔基体上119kDa锚蛋白AnkG119最为类似的ANK repeat包含蛋白。AnkG119与内质网及高尔基体特异的βⅢspectrin和COP Ⅰ共定位,预示着AnkG119可能在内膜系统的组装方面起某种作用。通过免疫荧光标记和免疫电镜技术发现,AtANK1定位于拟南芥多种类型细胞的内质网膜上。本文推测,AtANK1可能在植物细胞内质网功能域的组装或内质网与高尔基体间的物质交流方面起重要作用。
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