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[目的]随着全球防控及医疗诊疗水平的发展,结核病的发病率及死亡率均有明显的下降。然而,随着人口老龄化、HIV感染人数的增高及人员流动性的增加,结核病出现了复燃趋势。我们前期研究发现:miR-145在结核病中可能发挥重要作用,它可能通过调控靶基因(如IL-10和IL-16等)的表达参与结核病的病理过程,但这一结论仍需进一步的实验来验证。据报道,miR-145可通过靶向调控组蛋白脱乙酰酶11及IL-10的表达,促进M0向M2巨噬细胞活化。然而,IL-16在巨噬细胞极化中的作用尚不明确。本研究拟对miR-145和IL-16在巨噬细胞极化和抗菌功能中的作用进行验证。[材料和方法]本研究采用体外细胞试验进行研究,选用细胞为THP1单核细胞株。采用含有160nM PMA的含5%FBS的RPMI 1640培养基悬浮细胞并诱导THP1细胞分化。用CCK-8细胞计数试剂盒评价其与不同浓度IL-16孵育时的细胞活性。为了获得极化的巨噬细胞,采用IL-4和IL-13诱导PMA孵育后的THP1细胞(M0)向M2型极化巨噬细胞分化;同时采用IFN-γ和LPS导PMA孵育后的THP1细胞(M0)向M1型极化巨噬细胞分化(经典巨噬细胞活化)。通过鸡红细胞吞噬试验来量化IL-16对巨噬细胞吞噬作用的影响。用定量PCR方法定量检测THP1单核细胞和诱导巨噬细胞中IL-16,IL-10和miR-145的表达。用双荧光素酶报告试验验证了 miR-145和IL-16的靶向关系。用M1和M2巨噬细胞特征标记基因表达评价IL-16和mir-145对巨噬细胞极化的影响。[结果]M0巨噬细胞亚型由PMA诱导。用LPS和INF-γ特异性诱导成功地获得了 M1亚型的巨噬细胞,用IL-4和IL-13特异性诱导成功地获得了 M2亚型的巨噬细胞。M1巨噬细胞表达的IL-16水平高于M2巨噬细胞,但表达的IL-10和mir-145水平低于M2细胞。浓度高达150ng/mL的IL-16对THP-1细胞增殖没有影响,但通过下调IL-10和上调IL-1a和IL-6等促炎细胞因子,提高了巨噬细胞吞噬能力。其靶基因siRNA的敲除有利于巨噬细胞的维持,但降低吞噬能力。经双荧光素酶报告试验显示:miR-145可与IL-16 3’UTR发生特异性结合。miR-145通过下调IL-16、上调IL-10的表达从而促进M0巨噬细胞向M2亚型极化。[结论]IL-16通过调节IL-10、IL-1a和IL-6的表达调控巨噬细胞极化;IL-16是miR-145的靶基因;故miR-145通过靶向调节IL-16表达并增强IL-10的表达参与M2巨噬细胞极化。