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本工作对我国资源丰富的花椒叶进行了研究,对其中的黄酮和酚酸进行了鉴定和提取分离。发现牡荆素是花椒叶中的主要黄酮成分,可作为牡荆素新的植物原料来源。另一部分工作是对甜菊苷进行微生物转化研究,以得到更有价值的产物甜茶苷。(1)利用HPLC-MSn分离鉴定了小叶花椒叶中黄酮和酚酸类物质,共鉴定出9种黄酮和3种酚酸成份,总量分别为190.2mg/g和7.2mg/g。研究发现牡荆素是花椒叶中的主要黄酮成分。通过与牡荆素的传统来源植物牡荆,山楂和构树中的牡荆素量进行比较。发现花椒叶中牡荆素含量最高(14.11 mg/g),是构树叶中牡荆素含量(0.40mg/g)的36倍,是牡荆叶中牡荆素含量(3.23 mg/g)的4倍。(2)采用单因素实验和正交试验对花椒叶中牡荆素的提取条件进行了优化,以60%的乙醇溶液提取,料液比1:40、55℃超声提取100min,牡荆素的提取量为14.11mg/g,提取率为87.02%。(3)对花椒叶中的牡荆素进行了分离纯化工作。通过静态吸附和解析实验,选择了大孔树脂D101作为分离材料。30g花椒叶经60%乙醇提取,浓缩后得330ml提取液,经D101一次纯化后,得到纯度为42.3%的牡荆素。甲醇结晶进行二次纯化,牡荆素的纯度为88.5%。再次用甲醇重结晶后纯度为94.5%的牡荆素 105.8mg。(4)筛选了能特异转化SS为RS的尖孢镰刀菌。对影响转化效果的因素:转化方式、转化温度、pH和底物浓度等进行了研究。结果表明:采用固体培养尖孢镰刀菌所提取的酶液,在55℃,pH6.0的条件下对甜菊糖苷(2%)转化21h,SS转化率达到98.1%。用大孔树脂LX-T28对转化产物RS分离纯化。使用40%乙醇洗脱RA,洗脱液中RA/RS由上样液中的1.22上升到11.89,分离的样液中RA占原料中的73.40%。用60%乙醇洗脱RS,洗脱液中RS/RA由原来的0.81上升到7.83,得到纯度为69.88%的RS,回收率70.13%。(5)来源于Aspergillus oryzae β-半乳糖苷酶转化SS得到甜茶苷。该酶具有底物特异性,对SS的类似物RA、RC等没有催化活性。在60℃,pH4.5,SS的浓度25mg/mL,加酶量5KU/gSS转化5h,SS的转化率为99.2%,RS得率为82.85%。产物RS经大孔树脂LX-T28纯化后,纯度为91.4%,回收率为73.4%。(6)对不同品种甜叶菊成份分析表明,其中15号品种甜菊糖含量最高(13.18%),28号品种RA含量最高(9.24%),9号品种中RD的含量最高(1.3%)。为优育甜叶菊及特定原料供给提供参考。