组织工程化皮肤支架与创面敷料的研究

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本论文主要对组织工程皮肤支架与创面敷料的构建和特性进行了相关研究。通过混入白蛋白,透明质酸或海藻酸钠等物质形成壳聚糖聚电解质复合物,可以用于制备三维支架。通过冷冻干燥法制备的壳聚糖/白蛋白,壳聚糖/透明质酸聚电解质海绵可用于构建组织工程化真皮与表皮,壳聚糖/海藻酸钠聚电解质海绵可用于皮肤敷料的研究。第一部分主要研究改性壳聚糖的制备以及性能评价。利用流延和冷冻干燥的方法制备出不同孔道结构的海绵或者膜,然后对其材料的微观结构、含水量、孔隙率等特性进行观察测试;对材料的生物学性能进行评价,包括细胞毒性、粘附性以及增殖情况;同时也对材料的抑菌性能和体外降解情况做了相关的研究。结果显示,-70℃条件下制备的蛋白改性壳聚糖海绵支架具有较好的孔结构(60-120um)、含水量(87.78%)、孔隙率(85.75%)等物理性能以及细胞相容性、细胞亲和性和抑菌性等生物学性能,体外降解8周后失重率为53%而且蛋白仍然稳定存在。第二部分主要研究改性壳聚糖海绵支架构建组织工程化皮肤的初步研究。用人的成纤维细胞和角质形成细胞在材料上做较长时间的培养,试图培养出完整的真皮与表皮。结果表明,人的成纤维细胞能够在支架表面与内部正常生长与分泌胞外基质;角质形成细胞能在材料表面形成新老细胞交替层叠生长的现象,并且逐渐角质化。第三部分是壳聚糖/透明质酸复合皮肤支架的构建与评价,主要利用壳聚糖的抑菌、促进伤口愈合等特殊性能,加入适量具有皮肤美容性能的透明质酸,形成聚电解质复合物,可以加强材料的机械性能,改善材料的降解性能;然后对海绵支架的微观结构、含水量、水蒸气透过率等性能进行测试;再对材料的细胞相容性和细胞亲和性进行研究;最后是将材料直接应用于大鼠体内,观察创面的恢复情况。结果显示,壳聚糖/透明质酸复合皮肤支架具有良好的孔结构(60-120um)、含水量(90.15%)、水蒸气透过率(83.65%)等物理结构性能,基本满足皮肤支架的要求。在大鼠体内能够为大鼠细胞的生长提供空间结构,形成疏松的结缔组织和肉芽,没有过多的疤痕形成。第四部分是壳聚糖/海藻酸钠PEC聚电解质敷料的构建与评价,主要利用壳聚糖和海藻酸钠带有相反电荷的特点,通过第三介质导入的方法形成等比例的PEC,发挥两种天然高分子的特殊性能。将形成的PEC溶液通过流延和冷冻干燥的方法制备成多孔的短纤维聚集体,结果显示,壳聚糖/海藻酸钠PEC海绵表观上强度和柔韧性较好,含水量达84.80%,水蒸气透过率为85.37%,基本满足皮肤敷料的要求。然后对其细胞相容性和亲和性,体内修复试验进行研究。结果表明,材料生物相容性好。大鼠皮肤病理切片结果显示,伤口已经有大量的肉芽组织形成,甚至有鳞状上皮的出现,材料内有小血管形成。结果证明,壳聚糖/海藻酸钠PEC具有促进伤口愈合作用。
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