前期研究表明柠檬醛对黄曲霉产毒有着良好的抑制效果,但抑制机理仍不清楚。本实验主要通过制备PDA-Fe3O4纳米复合物,构建H2O2无酶传感器,并利用此无酶传感器实时监测柠檬醛刺激黄曲霉胞外H2O2释放的动态变化,研究柠檬醛抑制黄曲霉产毒的机理。为预防以及减少粮食中黄曲霉毒素的污染提供一定的理论基础和技术支撑。主要结论如下:1.通过原位共沉淀成功制备了PDA-Fe3O4纳米复合物,此复合物上均匀分布着单晶体磁性纳米颗粒,并且通过FTIR发现PDA-Fe3O4纳米复合物保持着PDA良好的亲水性。2.构建了一种新型的H2O2无酶电化学传感器(PDA-Fe3O4-Nafion/GCE)。其检测范围为0.5-6.0μM,灵敏度为51.06μA/m M,检测限为4.9×10-8 M(S/N=3),具有很好的选择性,而且能成功检测黄曲霉胞外释放的H2O2。3.利用HPLC检测不同培养时间和不同处理条件下黄曲霉毒素的含量,发现柠檬醛对黄曲霉短时间作用和长时间作用都能抑制其产毒。4.通过PDA-Fe3O4-Nafion/GCE实时监测黄曲霉胞外释放H2O2,荧光检测相应时间胞内ROS水平,以及对黄曲霉形态、抗氧化酶活性、胞内大分子(脂质和蛋白质)等的变化的测定,发现柠檬醛抑制黄曲霉产毒与ROS密切相关。且抑制机理可以分为短时间效应和长时间效应两种形式。柠檬醛短时间作用黄曲霉能刺激其胞内ROS大量向胞外释放,使胞内ROS达不到毒素产生所需的水平,从而抑制其产毒;而柠檬醛长时间作用黄曲霉,持续刺激黄曲霉产生ROS,使ROS水平显著提高,超出抗氧化酶清除能力范围,蓄积在胞内,引发黄曲霉氧化损伤,使黄曲霉不能维持正常的生理状态,从而抑制黄曲霉毒素的产生。