基于化学发光微粒子免疫分析法对乙型肝炎抗HBc和抗HBe的精密测定

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目的:通过化学发光微粒子免疫分析法对抗HBc和抗HBe阳性血清进行多点倍比稀释测定,并转化为抗体活性的新指标,分析抗体活性的新指标对临床的指导意义。方法:将抗HBc阳性标本和抗HBe阳性标本分别按HBsAg阳性和抗HBs阳性进行分组,每组标本进行多点倍比稀释,应用Architect i2000SR分别测定稀释后抗HBc阳性标本的抗HBc S/CO值及抗HBe阳性标本的抗HBe S/CO值,以测定值S/CO为Y轴,稀释倍数的对数为X轴作图,将测定值与X轴所围成的面积A作为标本抗体的总活性指标比较抗HBc阳性标本的两组差异和抗HBe阳性标本的两组差异,以同样方法取抗HBc阳性标本和抗HBe阳性标本分别按HBsAg阳性和抗HBs阳性进行分组,每组标本应用Architect i2000SR经典法直接测定其抗体值,用测定值S/CO进行比较抗HBc阳性标本的两组差异和抗HBe阳性标本的两组差异,用面积A作为标本抗体总活性的两组差异与用S/CO作为标本抗体总活性的两组差异进行对比分析。抗HBc阳性标本的HBsAg阳性组和抗HBe阳性标本的HBsAg阳性组分别测定谷丙转氨酶(ALT)和乙肝DNA(HBV-DNA),分析以面积A作为标本抗体的总活性指标与ALT和HBV-DNA两个指标的相关性。结果:抗HBc抗体阳性标本用稀释后的精密测量方法所确定的面积A进行两组比较t=15.58,P<0.0001,有统计学差异,在经典法中以S/CO作为抗体活性单位的两组比较t=2.55,P=0.013,有统计学差异,但精密测量方法的两组差异远远大于经典法的两组差异,面积A作为抗体活性单位与ALT和HBV-DNA两个指标的相关系数分别为0.235和0.209,P>0.05均不相关;抗HBe抗体阳性标本用稀释后的精密测量方法所确定的面积A进行两组比较t=-5.03,P<0.0001,有统计学差异,而在经典法中以S/CO作为抗体活性单位的两组比较t=-0.43,P=0.669>0.05,无统计学差异,面积A作为抗体活性单位与ALT和HBV-DNA两个指标的相关系数分别为-0.350和-0.273,P>0.05均不相关。用倍比稀释的精密测量方法所确定的面积作为抗HBc和抗HBe活性指标,明显优于CMIA经典法中抗HBc和抗HBe的直接测定值S/CO所代表的抗体活性。结论:采用精密测量方法所确定的面积作为抗HBc抗体和抗HBe抗体的活性可能更清楚的反映抗HBc和抗HBe在慢性乙肝发病期和恢复期的变化,在疾病的诊断、治疗和预后方面更具参考价值。
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