二甲双胍在卵巢癌细胞SKOV3体外增殖及凋亡中的作用

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卵巢癌是女性生殖系统常见的三大恶性肿瘤之一,其病死率居首位,严重威胁着女性的健康与生命,半个世纪以来,该病的发生率及死亡率在世界各地都呈明显增高的趋势,而且趋于年轻化[1]。在妇科肿瘤中,卵巢癌的治疗一直是临床工作面临的难题,因为卵巢癌早期症状不明显,就诊于率低,缺乏有效的早期诊断手段,2/3的患者初诊时已为晚期,失去手术时机[2]。目前对于卵巢癌的治疗,临床上采用的方案主要是在肿瘤细胞减灭术的基础上联合以紫杉醇、铂类为主的化疗。尽管起初化疗效应约50-80%,但由于化疗副反应较大、化疗价格昂贵以及原发性与获得性耐药等原因,患者的5年生存率仍然很低。因此,发现新的防治药物、提高化疗敏感性、逆转化疗耐药是临床医师密切关注的问题。二甲双胍作为胰岛素的增敏剂,于1995年被正式批准用于治疗II型糖尿病。因其降糖效果好、不降低基础血糖、副反应小、价格低廉等特点而广泛应用于临床[3]。多项研究证实[4-6]2型糖尿病患者比非糖尿病患者患有大肠癌、乳腺癌、子宫内膜癌、胰腺癌等恶性肿瘤的风险增加,且死亡率也明显增加。近年的研究提示,二甲双胍可能有抑制肿瘤生长的作用。许多体外实验研究发现二甲双胍对乳腺癌、胰腺癌、结直肠癌、前列腺癌等多种肿瘤均有生长抑制作用[7],但对卵巢癌的研究却甚少。因此,探讨二甲双胍对卵巢癌细胞增殖及凋亡的影响,观察其是否可以增加化疗药物的敏感性,有重要的临床价值,以期对卵巢癌的预防与临床治疗提供理论依据。目的:研究不同浓度的二甲双胍对人卵巢癌SKOV3细胞体外增殖及凋亡的影响,观察二甲双胍与紫杉醇联合作用SKOV3细胞是否存在协同效应。方法:以不同浓度(0、0.01、0.5、1、5、10mmol/L)的二甲双胍干预SKOV3细胞,在第24、48、72小时,采用MTT法检测各组细胞的OD值,计算增殖抑制率。在第48小时用流式细胞仪定量分析各组细胞凋亡率和细胞周期变化情况。将0.5mmol/L及1.0mmol/L的二甲双胍与600μg/l、1200μg/ml的紫杉醇单一或联合干预SKOV3细胞,在第48小时,检测各组细胞的OD值,计算增殖抑制率。结果:1、二甲双胍具有抑制卵巢癌细胞SKOV3增殖的作用,且该抑制作用呈时间和浓度依赖性。2、流式细胞术检测提示:SKOV3细胞经不同浓度的二甲双胍作用48小时后,与对照组相比,随二甲双胍浓度的增加,细胞的凋亡率明显增加(P<0.05),细胞周期发生明显的变化,G0/G1的比例下降,G2/M的比例上升(P<0.05),说明二甲双胍在G2/M期阻断细胞增殖。3、二甲双胍与紫杉醇联合对抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖具有协同作用,随着浓度的逐渐增加,增殖抑制逐渐增加(P<0.05),具有统计学意义。结论:1、二甲双胍能抑制卵巢癌细胞SKOV3的增殖并诱导其凋亡;2、二甲双胍可在G2/M期阻断卵巢癌SKOV3细胞增殖;3、二甲双胍与紫杉醇联用对抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖具有协同作用,二甲双胍能增加化疗药物的敏感性。
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