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油菜花粉中富含多糖、多肽、黄酮和长链脂肪酸类等物质,具有多种生理活性,如提高机体免疫能力、抗辐射损伤、预防和治疗前列腺疾病等。目前,油菜花粉抗肿瘤的研究多集中于花粉多糖这一活性物质,而对其中含量高达30%的另一活性成分---蛋白较少。前期我们已经研究了油菜花粉肽(Peptides from Rape Pollen Glutelines, PRPG)的最佳制备工艺,同时初步研究了油菜花粉肽的抗氧化活性和体外抑瘤效果,有明显效果。在前期研究基础上,本研究选用胃癌细胞SGC7901为研究对象,选择油菜花粉肽为实验材料,探究油菜花粉肽对SGC7901细胞生长的影响,拟从分子生物学的角度揭示油菜花粉肽的抗肿瘤机制,以期解决油菜花粉肽对胃癌治疗效果及其机制的相关问题。本文结果如下：1、用不同浓度的PRPG (10-7、10-6、10-5、10-4g/mL)刺激SGC7901细胞,无菌水和5-Fu (10-6g/mL)作为空白对照和阳性对照,运用WST-1和台盼蓝染色计数法检测药物刺激后细胞的增殖情况。结果表明,PRPG能有效抑制SGC7901细胞的生长,并且具有浓度效应关系。PRPG最高剂量组细胞生长率为空白对照组的65%,有显著性差异(p<0.01)。2、运用流式细胞术检钡PRPG作用SGC细胞后,细胞周期和凋亡率的变化情况。结果显示,PRPG刺激SGC7901细胞后,细胞凋亡率明显上升,与空白对照组相比,有显著性差异(p<0.05)。G1期细胞数量明显增多,提示PRPG处理SGC7901细胞后,细胞周期阻滞于G1期,细胞周期延长,从而延缓细胞生长,达到抑制肿瘤的作用。3、运用Western Blot方法检测了PRPG对凋亡相关蛋白、周期相关蛋白和Ras-Raf-MAPK通路中关键蛋白表达的影响。结果表明,PRPG刺激细胞后,与空白对照组相比,可显著上调凋亡相关蛋白Caspase3、Caspase9的表达,下调细胞周期蛋白CyclinA、CyclinD1、CyclinE的表达。除此之外,PRPG还可显著下调Ras-Raf-MAP通路中p-ERK及Ras蛋白的表达,提示PRPG可能通过Ras-Raf-MAPK信号通路实现其抗肿瘤作用。4、在探究ER-a36介导的PRPG抗肿瘤机制实验中我们发现,PRPG刺激胃癌细胞后,细胞数量明显下降,ER-a36及CyclinD1蛋白的表达均下降,与空白对照组相比,有显著性差异(p<0.01),且呈一定的剂量依赖性。高浓度E2β刺激SGC7901细胞后,细胞数量减少,ER-a36及CyclinD1表达下降；低浓度E2β刺激SGC7901细胞后,细胞数量增多,ER-a36及CyclinD1表达上升,两组相比差异有统计学意义(p<0.01)。提示PRPG效应类似于高浓度雌激素,即具有抑制胃癌细胞生长的作用,且ER-a36分子可能参与介导了其生物学效应途径。