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目的：观察清热化湿祛瘀法对慢性肾衰竭(chronic renal failure,CRF)湿热证患者外周血核转录因子-κB(nuclear factors-κB,NF-κB)信号转导通路中核转录因子-κB p65 (NF-κB P65)、磷酸化NF-κB抑制蛋白(p-IκBα)表达的影响；探讨清热化湿祛瘀法是否能通过抑制慢性肾衰竭湿热证患者的NF-κB信号通道,达到抑制肾小管上皮细胞转分化(Tubular epithelial-myofibroblast transdifferentiation,EMT)的发生和改善肾脏纤维化的作用。方法：选择68例CRF湿热证患者,根据随机数字表分为治疗组和对照组各34例,并从健康体检者中选取20例作为正常组(用于检测外周血NF-κB p65及p-IκBα).研究过程中共剔除5例,其中治疗组2例,对照组3例,最终完成63例,治疗组32例,对照组31例。治疗组男18例,女14例,年龄平均为(50.50±10.67)岁,对照组男17例,女14例,年龄平均为(47.86±12.75)岁。治疗组与对照组均给予西医基础治疗及中药保留灌肠,治疗组加服清肾颗粒,每天3次,每次1包,疗程为8周。1.评估两组患者治疗前后的临床疾病疗效、中医证候疗效及中医证候积分。2.检测两组患者治疗前后血肌酐(serum creatinine,Scr),并估算肾小球滤过率(estimated glomerular filtration rate,eGFR)。3.检测两组患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)中NF-κB p65、p-IκKBα的水平。结果：1.临床疾病疗效比较：治疗组疾病疗效总有效率为84.38%,对照组为54.84%,两组比较有显著性差异(P<0.01)2.中医证候疗效比较：治疗组中医证候疗效总有效率为81.25%,对照组为51.61%,两组比较有显著性差异(P<0.01)3.中医证候积分比较：两组患者治疗前中医证候积分比较无统计学意义(P>0.05),治疗后治疗组中医证候积分较治疗前,差异有显著统计学意义(P<0.01),治疗后对照组中医证候积分较治疗前,差异无统计学意义(P>0.05),治疗后治疗组中医证候积分较同期对照组,差异有显著性(P<0.01)4.Scr、eGFR比较：(1)治疗前治疗组与对照组Scr水平的差异无统计学意义(P>0.05),治疗后治疗组Scr水平较治疗前明显降低,差异有显著性(P<0.01),治疗后对照组Scr水平与治疗前比较,差异无统计学意义(P>0.05),治疗后治疗组Scr水平低于同期对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)治疗前治疗组与对照组eGFR水平的差异无统计学意义(P>0.05),治疗后治疗组eGFR水平较治疗前明显升高,差异有显著性(P<0.01),治疗后对照组eGFR水平与治疗前比较,差异无统计学意义(P>0.05),治疗后治疗组eGFR水平高于同期对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。5.PBMC中NF-κBp65比较：与正常组比较,治疗组、对照组治疗前PBMC中NF-κBp65含量较正常组高,差异有显著性(P<0.01)。治疗组和对照组治疗前PBMC中NF-κBp65含量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组治疗后PBMC中NF-κBp65含量较治疗前明显降低(P<0.01),对照组治疗后PBMC中NF-κBp65含量与治疗前相比较,差异无统计学意义(P>0.05),治疗组治疗后PBMC中NF-κBp65含量与同期对照组相比较,差异有显著性(P<0.01)6.PBMC中p-IκBα比较：与正常组比较,治疗组、对照组治疗前PBMC中p-IκBα含量均高于正常组,差异有显著性(P<0.01)。治疗组和对照组治疗前PBMC中p-IκBα含量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组治疗后PBMC中p-IκBα含量较治疗前明显降低(P<0.01),对照组治疗后PBMC中p-IκBα含量与治疗前相比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组治疗后PBMC中p-IκBα含量与同期对照组相比较,差异有显著性(P<0.01)结论：清肾颗粒能改善CRF湿热证患者的临床症状、降低Scr、升高eGFR,具有保护肾功能的作用。2.清肾颗粒可以降低CRF湿热证患者PBMC中NF-κBp65、 p-IκBα水平,说明清肾颗粒可以抑制NF-κB信号传导途径。3.患者服用清肾颗粒后未见药物不良反应,治疗前后安全性指标检测无异常变化,说明清肾颗粒安全性良好。目的：观察清肾颗粒对肾脏纤维化大鼠肾组织中核转录因子-κB p65 (nuclear factors-KBp65,NF-κB p65)、磷酸化NF-κB抑制蛋白(p-IκBα)和IKB激酶(IKKα)、单核细胞趋化性蛋白-1 (Monocytechemotatic protein-1,MCP-1)、细胞间粘附分子-1 (Intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)、α平滑肌肌动蛋白(alphasmooth muscle actin,α-SMA)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达的影响；探讨清肾颗粒是否能抑制单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)模型大鼠NF-κB信号通道,减轻肾小管EMT,起到抗肾脏纤维化的作用。方法：选用SD雄性大鼠48只,随机分为4组,包括假手术组、模型组、清肾颗粒组、吡咯烷二硫氨基甲酸(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)组。除假手术组12只大鼠只游离分出输尿管不结扎,其余36只大鼠均按正常方法制备UUO模型。清肾颗粒组：将清肾颗粒溶于温水制成混悬液,每1ml含药量为0.4g,按1ml/100g的剂量灌胃；PDTC组：将PDTC溶于温水制成混悬液,每lml含药量为15mg,按1m/100g的剂量灌胃；假手术组和模型组给予温水灌胃,lml/100g,各组大鼠每天灌胃1次,疗程为4周。1.生化法检测Scr、BUN和24小时尿蛋白定量(24-hour urine protein,24h Upro)。2.免疫组织化学法检测肾脏组织中α-SMA、E-cadherin的表达情况。3.Western blot法检测肾脏组织中NF-κB p65、p-IκBα、IKKα、MCP-1、 ICAM-1的蛋白含量。结果：1.各组大鼠BUN、Scr比较：(1)治疗前：各组大鼠BUN之间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后：与假手术组比较,清肾颗粒组、PDTC组、模型组大鼠BUN均高于假手术组,差异有显著性(P<0.01)。与模型组比较,清肾颗粒组和PDTC组大鼠BUN均低于模型组,差异有显著性(P<0.01)。与PDTC组比较,清肾颗粒组大鼠BUN低于PDTC组,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)治疗前：各组大鼠Scr之间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后：与假手术组比较,清肾颗粒组、PDTC组、模型组大鼠Scr均高于假手术组,差异有显著性(P<0.01)。与模型组比较,清肾颗粒组和PDTC组大鼠Scr均低于模型组,差异有显著性(P<0.01)。与PDTC组比较,清肾颗粒组大鼠Scr低于PDTC组,差异有统计学意义(P<0.05)。2.24小时尿蛋白定量比较：与假手术组比较,PDTC组、模型组大鼠24小时尿蛋白定量均较假手术组高,差异有显著性(P<0.01)；清肾颗粒组大鼠24小时尿蛋白定量高于假手术组,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,清肾颗粒组、PDTC组大鼠24小时尿蛋白定量均低于模型组,差异有显著性(P<0.01)与PDTC组比较,清肾颗粒组大鼠24小时尿蛋白定量低于PDTC组,差异有统计学意义(P<0.05)3.各组大鼠肾脏组织ICAM-1蛋白表达情况比较(Western blot法)：与假手术组比较,PDTC组、模型组大鼠肾脏组织ICAM-1蛋白表达均高于假手术组,差异有显著性(P<0.01)；清肾颗粒组大鼠肾脏组织ICAM-1蛋白表达较假手术组高,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,清肾颗粒组、PDTC组大鼠肾脏组织ICAM-1蛋白表达均低于模型组,差异有显著性(P<0.01)。与PDTC组比较,清肾颗粒组大鼠肾脏组织ICAM-1蛋白表达低于PDTC组,差异有统计学意义(P<0.05)。4.各组大鼠肾脏组织IKKa蛋白表达情况比较(Western blot法)：与假手术组比较,PDTC组、模型组大鼠肾脏组织IKKa蛋白表达均高于假手术组,差异有显著性(P<0.01)；清肾颗粒组大鼠肾脏组织IKKa蛋白表达较假手术组高,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,清肾颗粒组、PDTC组大鼠肾脏组织IKKa蛋白表达均低于模型组,差异有显著性(P<0.01)。与PDTC组比较,清肾颗粒组大鼠肾脏组织IKKa蛋白表达较PDTC组低,但差异无统计学意义(P>0.05)。5.各组大鼠肾脏组织MCP-1蛋白表达情况比较(Western blot法)：与假手术组比较,PDTC组、模型组大鼠肾脏组织MCP-1蛋白表达均高于假手术组,差异有显著性(P<0.01)；清肾颗粒组大鼠肾脏组织MCP-1蛋白表达较假手术组高,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,清肾颗粒组、PDTC组大鼠肾脏组织MCP-1蛋白表达均低于模型组,差异有显著性(P<0.01)。与PDTC组比较,清肾颗粒组大鼠肾脏组织MCP-1蛋白表达低于PDTC组,差异有统计学意义(P<0.05)6.各组大鼠肾脏组织NF-κB p65蛋白表达情况比较(Western blot去)：与假手术组比较,清肾颗粒组、PDTC组、模型组大鼠肾脏组织NF-κB p65蛋白表达均高于假手术组,差异有显著性(P<0.01)。与模型组比较,清肾颗粒组、PDTC组大鼠肾脏组织NF-κB p65蛋白表达均低于模型组,差异有显著性(P<0.01)。与PDTC组比较,清肾颗粒组大鼠肾脏组织NF-κB p65蛋白表达低于PDTC组,差异有统计学意义(P<0.05)7.各组大鼠肾脏组织p-IκBα蛋白表达情况比较(Western blot法)：与假手术组比较,清肾颗粒组、PDTC组、模型组大鼠肾脏组织p-IκBa蛋白表达均高于假手术组,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,清肾颗粒组、PDTC组大鼠肾脏组织p-IκBα蛋白表达均低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。与PDTC组比较,清肾颗粒组大鼠肾脏组织p-IκBα蛋白表达低于PDTC组,差异有统计学意义(P<0.05)8.免疫组化α-SMA染色比较：与假手术组比较,清肾颗粒组、PDTC组、模型组大鼠α-SMA半定量评分均高于假手术组,差异有显著性(P<0.01)。与模型组比较：清肾颗粒组、PDTC组大鼠α-SMA半定量评分均低于模型组,差异有显著性(P<0.01)。与PDTC组比较,清肾颗粒组大鼠α-SMA半定量评分低于PDTC组,差异有统计学意义(P<0.05)9.免疫组化E-cadherin染色比较：与假手术组比较,清肾颗粒组、PDTC组、模型组大鼠E-cadherin着色半定量评分均低于假手术组,差异有显著性(P<0.01)与模型组比较,清肾颗粒组、PDTC组大鼠E-cadherin着色半定量评分均高于模型组高,差异有显著性(P<0.01)。与PDTC组比较,清肾颗粒组大鼠E-cadherin着色半定量评分高于PDTC组,差异有统计学意义(P<0.05)结论1.NF-κB信号通道活化参与UUO模型大鼠发病过程。2.清热化湿祛瘀法可降低UUO模型大鼠血肌酐、尿素氮、24h尿蛋白定量。3.清热化湿祛瘀法可抑制NF-κB信号通道,减轻炎症反应,从而改善肾小管EMT,起到抗肾脏纤维化的作用。