【摘 要】
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目的:通过观察坐骨神经慢性压迫模型导致的神经性疼痛大鼠,对比其造模前后以及经温针疗法治疗前后一般情况和行为学变化,并研究大鼠下丘脑中异常表达的m RNA,对其靶基因进行生物学功能及通路分析。探讨蒙医温针疗法的作用机制,为蒙医温针治疗提供新的理论依据。方法:选取32只SD大鼠,随机分为:假手术组、模型组、温针组、西药组,每组8只。适应性饲养1周后,第8天采用Bennett和Xie方法进行造模,假手术
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目的:通过观察坐骨神经慢性压迫模型导致的神经性疼痛大鼠,对比其造模前后以及经温针疗法治疗前后一般情况和行为学变化,并研究大鼠下丘脑中异常表达的m RNA,对其靶基因进行生物学功能及通路分析。探讨蒙医温针疗法的作用机制,为蒙医温针治疗提供新的理论依据。方法:选取32只SD大鼠,随机分为:假手术组、模型组、温针组、西药组,每组8只。适应性饲养1周后,第8天采用Bennett和Xie方法进行造模,假手术组只露出坐骨神经不结扎其余步骤与模型组相同。造模后第15天开始治疗,假手术组和模型组不治疗,仅在腹腔注射生理盐水。温针组选用赫依穴,肾穴每天进行温针疗法治疗并腹腔注射生理盐水。西药组给予阿米替林（0.1g/kg）腹腔注射。造模前一天,造模后第7、14、21、28天观察大鼠一般行为表现,进行机械刺激阈值（MWT）和热缩腿阈值（TWL）等行为学测定。治疗结束后取材,收集大鼠下丘脑组织,从假手术组、模型组、温针组随机选取4只大鼠用高通量测序技术筛选差异表达m RNA,对显著差异表达的m RNA进行靶基因预测,对靶基因进行GO功能富集分析和KEGG通路分析。挖掘出与坐骨神经痛和认知障碍均相关的信号通路并利用QPCR技术检测目标通路相关的靶基因,从而验证高通量测序结果。结果:1.一般情况:造模前各组小鼠的体重,饮水量,喂食量,粪便,毛发,行为动作等均无显著性差异（P＞0.05）。造模后大鼠毛色下降,活动减少,行走时跛行,偶尔肢体上抬无法着地,随着造模时间的延长,上述症状加重,并出现大鼠经常性的舔爪,甩爪甚至自残等症状。经治疗后假手术组、温针组、西药组相比于模型组,上述症状明显减轻。2.机械刺激阈值（MWT）、热缩腿阈值（TWL）行为学实验中造模前各组间无显著性差异（P＞0.05）,造模后与假手术组相比模型组、温针组、西药组阈值明显降低,有显著性差异（P＜0.05）;治疗后与模型组相比,假手术组、蒙医温针组、西药组阈值明显升高,有显著性差异（P＜0.05）。3.转录组测序结果:假手术组与模型组比较,共有361个差异表达m RNA,其中227个m RNA表达上调,134个m RNA表达下调。模型组与温针组比较,共有215个差异表达m RNA,其中57个表达上调,158个表达下调。GO富集与实验相关的主要集中在轴突发育、突出后膜电位等方面;KEGG通路富集主要集中在神经活性配体-受体相互作用通路,GABA信号通路,WNT信号通路等。4.QPCR结果:模型组与温针组相比,SLC6A12表达显著下降（P＜0.01）,ADCY1和GABRD等基因表达显著增加（P＜0.01）,证明了与转录组序列测定结果一致。结论:蒙医温针疗法针刺CCI模型大鼠赫依穴及肾穴可以促进赫依血循行,镇痛,通白脉从而改善大鼠的运动障碍,情绪不稳和认知障碍等症状。其具体的作用机制可能是通过靶基因的轴突发育等多项生物学功能及GABA、WNT等通路的参与从而影响慢性神经痛的发展。
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