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牙周袋局部用药是治疗慢性牙周炎的重要方法。羧甲基壳聚糖具有良好生物相容性,且无毒、无刺激性。奥硝唑是一种新型抗菌素,其毒副作用小,对口腔厌氧菌有较强的杀灭作用。本研究通过对奥硝唑羧甲基壳聚糖溶胶在牙周炎治疗中的初步观察,以期为进一步临床应用提供相关资料。 目的:通过动物实验初步探讨羧甲基壳聚糖的组织相容性,测定其对口腔重要厌氧菌的抑菌性能,评价奥硝唑羧甲基壳聚糖溶胶应用于牙周袋后对改善牙周病损状况的效果,为临床应用提供参考依据。 方法:本研究分两部分: 1 奥硝唑、羧甲基壳聚糖及奥硝唑羧甲基壳聚糖复合成溶胶后对口腔重要厌氧菌抑菌性能及生物相容性的初步评价 1.1 对口腔厌氧菌的最低抑菌浓度(MIC)测定 用相应的液体培养基分别对12株口腔重要厌氧菌菌株进行厌氧菌培养和需氧菌培养。配制不同含量羧甲基壳聚糖、奥硝唑、复合奥硝唑羧甲基壳聚糖三种待检培养液,各取其2ml,接种相应的细菌菌液50μl(浓度为10~8/ml),一式三份,培养48—72小时后观测结果,测定其最低抑菌浓度(MIC)。 1.2 对小鼠肌肉的刺激作用中文摘要 向三组小鼠股部肌肉分别注射0.Zml灭菌后的梭甲基壳聚糖溶胶、奥硝哇按甲基壳聚糖溶胶、水溶性淀粉。观察并记录各组小鼠在注射后ld、4d、7d、14d、Zld注射部位及全身反应,并取注射部位肌肉组织和主要脏器的组织,经中性缓冲福尔马林液固定,HE染色后光镜下观察组织学改变;第7d、14d、21d取注射局部肌肉组织经2.5%戊二醛固定,常规透射电镜制片,透射电镜观察组织超微结构改变。2奥硝哇梭甲基壳聚糖溶胶对牙周病损主要指标的初步观察 选择牙周袋深度为Slnln一10Inln的慢性牙周炎活动期的牙周病损位点100个作为研究对象。随机分组,均进行跟上洁治,然后,对照组在治疗前基线(0d)时行单纯眼下刮治术;治疗组在基线(od)时完成眼下刮治后每5天向牙周袋内置入奥硝哇梭甲基壳聚糖溶胶,共4次。于治疗前基线(od)、治疗后(25d)时刻记录菌斑指数、出血指数、探诊深度,并采集研究位点眼下菌斑,分别进行刚果红负性染色试验记数跟下菌斑中螺旋体数量,用苯甲酞精氨酸蔡酞胺水解试验 (BANA)测定跟下菌斑胰蛋白酶样酶(TLF)水平(以0D值表示)。 结果l奥硝哇、梭甲基壳聚糖及奥硝哇梭甲基壳聚糖复合后对口腔重要厌氧菌抑菌性能及生物相容性的初步评价1 .1经液体梯度稀释法测定梭甲基壳聚糖对牙酿叶琳A入义召327入放线共生放线菌Y,、中间普氏菌A7及毖叹绍I、牙酿噬二氧化碳纤维菌A几欢灯改24、黄褐噬二氧化碳纤维菌A7艺艺诊7872、产黑普氏菌AT(飞么灵阿乐白色念珠菌丑敌笼沙、牙 2 中文’摘要髓叶琳菌A几乙叉刁那刁、齿普氏菌A几义:绍了召万、变形链球菌么远缘链球菌A兀艺尝760入粘性放线菌A7艺艺’1 9246的MIC,其值分别为20000,10000,5000,80000,20000,>80000,20000,5000,20000,10000,60000,40000陀/ml。 经测定奥硝哇对牙酿叶琳菌A入义召327凡放线共生放线菌乙、中间普氏菌A几笼么兄万1、牙髓叶琳菌 A7’C(刃5了06的MIC,其值分别为5、40、20、)160陀/ml。 经测定奥硝哇梭甲基壳聚糖复合后对牙跟叶琳菌A几义’3.绍7入放线共生放线菌乙、中间普氏菌A几艺么兄万了、牙髓叶琳菌A7艺艺万.匆06的MIC,其值分别为1 .25、20、80、40陀/ml。1.2各组溶胶对小鼠的股部肌肉组织刺激 从组织学及超微结构的改变来看,梭甲基壳聚糖溶胶组,在本试验观察阶段均显示为炎症反应轻,刺激性小。淀粉组在整个观察期间有大量急慢性炎细胞浸润,出现多核巨细胞,甚至有化脓灶出现,表示淀粉引起的炎症反应相对明显。而奥硝哇梭甲基壳聚糖溶胶组刺激作用介于两者之间,其表现比淀粉更温和。2奥硝哇梭甲基壳聚糖溶胶对牙周病损主要指标的观察2.1结果表明,在基线(od)与治疗后25d时奥硝哇梭甲基壳聚糖组在降低PD、PLI、BI的程度、减少酿下菌斑螺旋体数量和跟下菌斑胰蛋白酶样酶水平方面均明显优于对照组(只0 .05)。2.2在治疗后25d奥硝哇梭甲基壳聚糖溶胶的牙周位点组与对照组的PLI、PD均无改变(乃0.05)。而BI、齿良下菌斑螺旋体数量、齿及下菌斑胰蛋白酶样酶水平的OD值在奥硝哇梭3 中文摘要甲基壳聚糖组明显低于对照组的值(只0.05)。在减少牙跟炎症、对螺旋体厌氧菌的抑制作用方面均优于对照组。 结论1梭甲基壳聚糖对12株口腔重要厌氧菌均有一定抑制作 用;奥硝哇梭甲基壳聚糖联合应用可降低4株口腔重要 厌氧菌MIC,具有联合加强抑菌性能的现象。2梭甲基壳聚糖溶胶对小鼠肌组织无刺激性,具有良好的 生物相容性;奥硝哇梭甲基壳聚糖溶胶对小鼠肌组织刺 激性轻微。3奥硝哩梭甲基壳聚糖溶胶牙周袋内置入,在25天临床疗 效观察与单纯酿下刮治相比,可降低出血指数、减少跟 下菌斑螺旋体数量和胰蛋白酶样酶水平,有可能成为有 价值的