低强度810nm半导体激光对软骨细胞光生物调节作用的实验研究

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由运动创伤、各种疾病或其它原因引起的关节软骨损伤在运动医学上十分常见。关节软骨损伤后自身修复能力有限,且损伤早期的诊断及治疗困难,并且病情容易逐渐加重而导致关节功能异常,最终导致运动员运动寿命的缩短。目前临床上应用的许多治疗方法都不是理想的修复方法。光生物调节作用(photobiomodulation,PBM)是低强度激光(low intensity laser,LIL)对细胞和伤口的一种安全的调节方法。LIL疗法可望成为一种治疗软骨损伤的安全疗法。  目的:建立兔关节软骨细胞离体培养的低强度810nm Ga-Al-As半导体激光(low intensity810nm Ga-Al-As diode laser,LIGL)光照模型,并研究LIGL对兔软骨细胞增殖和胶原合成的影响,试图找到LIGL照射能引起软骨细胞增殖的最佳照射强度和照射剂量。  方法:新西兰白兔的关节软骨细胞,用浓度为2%的新生牛血清(newborn calfserum,NCS)培养媒介培养。采用功率密度分别为1.75mW/cm2,3.50mW/cm2,5.25mW/cm2,7.00mW/cm2和8.75mW/cm2的LIGL以连续方式照射软骨细胞,每天照射5min,共5d。在培养至第8天时,用MTT法检测细胞的活性,了解细胞的增殖情况;用化学比色法检测细胞外基质中羟脯氨酸浓度,观察细胞胶原蛋白的合成情况。  结果:(1)MTT结果显示,各LIGL照射组细胞数量明显增加,与无LIGL照射组的差异有统计学意义(P<0.01),其中最佳照射功率密度(光强)为7.00mW/cm2,实际最佳照射能量密度为2.04J/cm2。(2)羟脯氨酸法间接测定胶原含量的结果表明,LIGL照射7.00mW/cm2组与对照组第2,4,6,8天胶原含量的测定表明,照射组胶原含量先增加后降低,其中第6天照射组胶原含量最高,与相应对照组有极显著差异(P<0.01),此后胶原含量显著下降,第8天与对照组有极显著差异(P<0.01)。第8天实验结束时,其它各LIGL照射组胶原含量也显著低于对照组(P<0.01),8.75mW/cm2组与3.50~7.00mW/cm2有显著差异(P<0.05)。  结论:LIGL以上述实验所选功率密度促能进离体培养的兔关节软骨细胞的增殖,增殖可能是由于胶原合成的增加引起。LIGL有望成为临床治疗软骨损伤的一种有效方法。
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