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目前研究最多、应用最广的定量测定蛋白质的分子光谱分析法是吸光光度法、荧光光度法和最新发展起来的共振光散射分析法。本文以方法分类对蛋白质的分广光谱分析方法近年来的研究进展进行了综述。并通过试验研究了三种测定蛋白质的新方法。 一是研究了Ce3+-杯[8]芳烃-蛋白质体系的相互作用和荧光发光情况。试验结果表明Ce3+可产生λex2max=254nm,λem2max=361nm的自身荧光。杯[8]芳烃在一定条件下能猝灭其荧光,加入蛋白质后体系的荧光又进一步猝灭,故可利用杯[8]芳烃-Ce3+形成的镧系超分子作荧光探针测定蛋白质,同时初步探讨了体系的相互作用机理。该试验方法的线性范围为1.1~11.4μg/mL,检出限为2.83×103μg/mL。本方法简单、可靠、灵敏度高。 二是研究了在弱碱性条件下,溴麝香草酚蓝与人血清白蛋白的相互作用,发现了在该条件下,蛋白质的存在使溴麝香草酚蓝在λmax=615nm处的吸收发生了明显的减色作用,故可以作为测定蛋白质的光谱探针,并有摩尔法求出了该条件下的最大结合数。该法的线性范围为11.3-800μg/mL,检测限为1.6μg/mL。方法线性范围较宽、重现性好、操作简便。 三是研究了四磺基铈酞菁与人血清白蛋白作用的共振光散射光谱,在pH=2.0时,人血清白蛋白的加入导致铈酞菁共振光散射的增强,在412nm处存在一共振光散射强峰,其强度增加值与人血清白蛋白的浓度呈线性关系。据此建立了一种测定人血清白蛋白的共振光散射法,该方法的线性范围为0.1~1.7mg/L,检出限为0.024mg/L。