lncRNA FENDRR对宣威地区人群肺癌细胞的生物学行为的影响

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[目的]肺癌是全球发病率和死亡率增长最快,对人类生命健康危害最大的恶性肿瘤之一。云南宣威是中国肺癌的高发区,由相关研究显示:在云南宣威,男性肺癌患者的平均死亡率为98.10/10万,女性肺癌患者的平均死亡率为83.28/10万,其中,不吸烟的女性肺癌死亡率很高,能达到120/10万。最近的调查显示,宣威地区男女死亡率为全国农村水平的3-6倍。宣威地区人群肺癌高死亡率的主要原因是早期诊断困难,确诊的患者大部分处于晚期阶段,对其缺乏有效的诊疗手段。因此,需要尽快发掘宣威地区人群肺癌相关的分子诊断标志物,为临床的早期诊断及治疗提供帮助。目前,越来越多的研究发现LncRNA能在多个层面上调控基因的表达水平,使其在肿瘤的发生、发展及转归方面都起着重要的作用。本研究通过检测IncRNA FENDRR在宣威地区人群肺癌细胞XLA-07中的表达情况,探讨FENDRR基因对宣威地区人群肺癌细胞XLA-07增殖、迁移、侵袭以及凋亡的影响。[方法]1.提取宣威地区人群肺癌细胞XLA-07中的IncRNA FENDRR,通过实时荧光定量PCR检测FENDRR的表达情况。2.构建过表达FENDRR基因的慢病毒载体,病毒纯化后包装质粒,制成具有感染力的病毒颗粒,对慢病毒质粒测序,检测病毒滴度。使用病毒颗粒对XLA-07细胞进行转染,通过实时荧光定量PCR检测转染效率。3.使用CCK8法检测细胞的增殖能力。4.使用划痕法检测细胞的迁移能力。5.使用Transwell法检测细胞的侵袭能力。6.使用Annexin V/PI双染细胞检测细胞凋亡情况。[结果]1.实时荧光定量PCR检测:LV-FENDRR过表达组与XLA-07对照组及N-FENDRR空载体组相比,XLA-07细胞内的FENDRR基因表达显著上调(P<0.05),空载体组与对照组细胞内FENDRR基因表达变化无明显统计学差异(P﹥0.05)。2.过表达FENDRR结果表明:CCK8法在490nn波长下活细胞数量与吸光度值呈正比关系,LV-FENDRR过表达组吸光度低于XLA-07对照组和N-FENDRR空载体组,说明LV-FENDRR过表达组的宣威地区人群肺癌细胞XLA-07的增殖速度受到抑制(P<0.05);过表达FENDRR降低了 XLA-07细胞的迁移能力;tranwell细胞侵袭结果过表达组与对照组及空载体组相比侵袭能力明显下降(P<0.05),对照组和空载体组侵袭能力没有显著差异(P>0.05);过表达FENDRR促进了 XLA-07细胞的早期凋亡。[结论]LncRNAFENDRR能抑制XLA-07细胞增殖、迁移、侵袭并促进凋亡,在宣威地区人群肺癌中具有明显的抑癌活性,有望成为预防和治疗肺癌的潜在靶点。
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