兔自体脂肪来源干细胞局部应用对增生性瘢痕的作用研究

来源 :大连医科大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:shinobu1314
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目的:进行兔脂肪来源干细胞的提取与培养;观察干细胞的形态及生长传代情况;建立兔耳瘢痕模型,探索兔耳瘢痕模型的可行性;探索脂肪来源干细胞对增生性瘢痕的作用,为瘢痕治疗探索新的思路。方法:选取6只新西兰大白兔(均为雄性),切取腹股沟区正常皮下脂肪组织。用酶消化法提取干细胞,DMEM培养基培养, 3-5×104个/ml接种于培养皿。利用倒置显微镜对原代培养的细胞每天进行形态学观察;建立兔耳瘢痕模型:于兔耳腹侧设计直径1cm的圆形创口,切除皮肤至软骨并剔除软骨膜,止血包扎,每只耳朵腹侧各4个创口,左耳为实验组,右耳对照组。采用第一部分已经培养的生长活跃的兔脂肪来源干细胞(浓度约5x106/ml)1ml于实验组1天、7天、20天兔耳增生性瘢痕分别进行环形注射,特别于软骨上层次注射,每块瘢痕注射总量为0.2ml,对照组注射同样剂量的生理盐水,于实验增生最显著的第35天切除两耳增生性瘢痕甲醛固定,石蜡包埋、切片、染色。结果:细胞呈成纤维细胞样生长,原代培养的细胞7-10天即达70 %-80 %融合。可进行常规传代培养。瘢痕模型于术后第20天上皮化完成,30天左右增生最为明显,并且在此高度持续2个月左右后部分开始软化,但仍有一半左右的圆形创面增生块继续保持增生状态,最长持续时间已超过180天。实验组瘢痕增生高度及持续时间明显低于对照组,实验组与对照组在统计学上有显著差异(P<0.01)结论:ADSCs取材方便,体外培养及扩增迅速,具有干细胞特性。兔自体脂肪来源干细胞对兔耳增生瘢痕有抑制作用。
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